棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2011年
3期
205-211
,共7页
刘坤%单国芳%李付广%刘传亮%张朝军%张雪妍%武芝侠
劉坤%單國芳%李付廣%劉傳亮%張朝軍%張雪妍%武芝俠
류곤%단국방%리부엄%류전량%장조군%장설연%무지협
海岛棉%ERF%黄萎病%EREB5%基因克隆
海島棉%ERF%黃萎病%EREB5%基因剋隆
해도면%ERF%황위병%EREB5%기인극륭
近年来,ERF(Ethylene-responsive element binding factor)家族转录因子已成为植物抗逆、抗病的分子机制和作物分子育种研究的热点.本研究以电子克隆、同源扩增和RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技术相结合的方法从海岛棉中分离出了一条新的ERF族转录因子基因,命名为EREB5.该基因包含一个573 bp长的开放阅读框.预期编码190 aa长的蛋白质分子.序列分析表明该蛋白除含有一个ERF保守域外,还含有一段核定位信号序列、一段富丝氨酸的激活域、多种磷酸化位点和一个土豆抑制子I型家族基序等.构建系统发育树分析表明该因子属于ERF亚家族B3亚组.瞬时表达实验证明该因子定位于细胞核内,同时,凝胶阻滞实验结果说明EREB5蛋白和GCC盒具有较强的结合能力.再者,荧光定量PCR结果表明乙烯和黄萎病菌处理可以诱导该基因的表达.这些结果暗示EREB5蛋白很可能在黄萎病抗性机制中扮演者重要角色.
近年來,ERF(Ethylene-responsive element binding factor)傢族轉錄因子已成為植物抗逆、抗病的分子機製和作物分子育種研究的熱點.本研究以電子剋隆、同源擴增和RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技術相結閤的方法從海島棉中分離齣瞭一條新的ERF族轉錄因子基因,命名為EREB5.該基因包含一箇573 bp長的開放閱讀框.預期編碼190 aa長的蛋白質分子.序列分析錶明該蛋白除含有一箇ERF保守域外,還含有一段覈定位信號序列、一段富絲氨痠的激活域、多種燐痠化位點和一箇土豆抑製子I型傢族基序等.構建繫統髮育樹分析錶明該因子屬于ERF亞傢族B3亞組.瞬時錶達實驗證明該因子定位于細胞覈內,同時,凝膠阻滯實驗結果說明EREB5蛋白和GCC盒具有較彊的結閤能力.再者,熒光定量PCR結果錶明乙烯和黃萎病菌處理可以誘導該基因的錶達.這些結果暗示EREB5蛋白很可能在黃萎病抗性機製中扮縯者重要角色.
근년래,ERF(Ethylene-responsive element binding factor)가족전록인자이성위식물항역、항병적분자궤제화작물분자육충연구적열점.본연구이전자극륭、동원확증화RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)기술상결합적방법종해도면중분리출료일조신적ERF족전록인자기인,명명위EREB5.해기인포함일개573 bp장적개방열독광.예기편마190 aa장적단백질분자.서렬분석표명해단백제함유일개ERF보수역외,환함유일단핵정위신호서렬、일단부사안산적격활역、다충린산화위점화일개토두억제자I형가족기서등.구건계통발육수분석표명해인자속우ERF아가족B3아조.순시표체실험증명해인자정위우세포핵내,동시,응효조체실험결과설명EREB5단백화GCC합구유교강적결합능력.재자,형광정량PCR결과표명을희화황위병균처리가이유도해기인적표체.저사결과암시EREB5단백흔가능재황위병항성궤제중분연자중요각색.
