中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
50期
9437-9440
,共4页
姚登兵%姚敏%王理%董志珍%姚登福
姚登兵%姚敏%王理%董誌珍%姚登福
요등병%요민%왕리%동지진%요등복
肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅱ(CPT-Ⅱ)%外显子4%基因扩增%变异%流感病毒A
肉毒堿棕櫚酰轉移酶Ⅱ(CPT-Ⅱ)%外顯子4%基因擴增%變異%流感病毒A
육독감종려선전이매Ⅱ(CPT-Ⅱ)%외현자4%기인확증%변이%류감병독A
背景:肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅱ(Carnitine palmitoyltransferase-Ⅱ,CPT-Ⅱ)位于细胞线粒体内膜上,是脂肪酸氧化过程中起关键作用的酶之一.目前关于流感病毒感染与CPT-Ⅱ基因变异尚未见报道.目的:构建CPT-Ⅱ第4号外显子(E4)表达质粒及其核苷酸变异分析.方法:从流感病毒感染2例患者外周血中提取DNA,以PCR法扩增CPT-Ⅱ基因的第4号外显子,将其片段插入pGEM-T载体,以T4 DNA连接酶,构建T-CPT-Ⅱ E4,转化大肠杆菌DH5α细胞,增菌,制备质粒,EcoR I酶切、测序和变异分析.结果与结论:成功构建重组表达质粒pGEM-T-CPT-ⅡE4,经DNA测序,证实质粒中插入CPT-Ⅱ第4号外显子完整序列,全长1 305个核苷酸,编码435个氨基酸;与Genebank源序列对照比较,发现含有两个变异位点:1 618(GTC→ATC)和1 858 (TTT→TCT),对应氨基酸为V368I和F448L.
揹景:肉毒堿棕櫚酰轉移酶Ⅱ(Carnitine palmitoyltransferase-Ⅱ,CPT-Ⅱ)位于細胞線粒體內膜上,是脂肪痠氧化過程中起關鍵作用的酶之一.目前關于流感病毒感染與CPT-Ⅱ基因變異尚未見報道.目的:構建CPT-Ⅱ第4號外顯子(E4)錶達質粒及其覈苷痠變異分析.方法:從流感病毒感染2例患者外週血中提取DNA,以PCR法擴增CPT-Ⅱ基因的第4號外顯子,將其片段插入pGEM-T載體,以T4 DNA連接酶,構建T-CPT-Ⅱ E4,轉化大腸桿菌DH5α細胞,增菌,製備質粒,EcoR I酶切、測序和變異分析.結果與結論:成功構建重組錶達質粒pGEM-T-CPT-ⅡE4,經DNA測序,證實質粒中插入CPT-Ⅱ第4號外顯子完整序列,全長1 305箇覈苷痠,編碼435箇氨基痠;與Genebank源序列對照比較,髮現含有兩箇變異位點:1 618(GTC→ATC)和1 858 (TTT→TCT),對應氨基痠為V368I和F448L.
배경:육독감종려선전이매Ⅱ(Carnitine palmitoyltransferase-Ⅱ,CPT-Ⅱ)위우세포선립체내막상,시지방산양화과정중기관건작용적매지일.목전관우류감병독감염여CPT-Ⅱ기인변이상미견보도.목적:구건CPT-Ⅱ제4호외현자(E4)표체질립급기핵감산변이분석.방법:종류감병독감염2례환자외주혈중제취DNA,이PCR법확증CPT-Ⅱ기인적제4호외현자,장기편단삽입pGEM-T재체,이T4 DNA련접매,구건T-CPT-Ⅱ E4,전화대장간균DH5α세포,증균,제비질립,EcoR I매절、측서화변이분석.결과여결론:성공구건중조표체질립pGEM-T-CPT-ⅡE4,경DNA측서,증실질립중삽입CPT-Ⅱ제4호외현자완정서렬,전장1 305개핵감산,편마435개안기산;여Genebank원서렬대조비교,발현함유량개변이위점:1 618(GTC→ATC)화1 858 (TTT→TCT),대응안기산위V368I화F448L.
