中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2011年
6期
415-419
,共5页
梁权%罗春贞%毛培菊%王缦
樑權%囉春貞%毛培菊%王縵
량권%라춘정%모배국%왕만
HIV-1%蛋白质类%免疫活性
HIV-1%蛋白質類%免疫活性
HIV-1%단백질류%면역활성
目的 高效表达HIV-1 gp41基因片段,满足生产HIV体外检测试剂的需要.方法 以含HIV-1 gp41基因的质粒X1为模板,采用PCR方法扩增出gp41基因,克隆入E1载体构建重组表达质粒E1-1,转化E.coli BL21DE3感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,使用镍螯合琼脂糖亲和层析柱(Ni-NTA Agaros)纯化重组蛋白,通过ELISA法检测重组蛋白的免疫反应性和特异性.结果 SDS -PAGE鉴定结果表明,重组E1-1蛋白获得了正确的表达;纯化的重组E1-1蛋白纯度＞95％; ELISA检测结果表明,重组E1-1蛋白具有较优的免疫反应性和特异性.结论 成功表达出具有较高免疫反应性的重组E1-1蛋白,可应用于HIV体外检测试剂.
目的 高效錶達HIV-1 gp41基因片段,滿足生產HIV體外檢測試劑的需要.方法 以含HIV-1 gp41基因的質粒X1為模闆,採用PCR方法擴增齣gp41基因,剋隆入E1載體構建重組錶達質粒E1-1,轉化E.coli BL21DE3感受態細胞,經異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導後,使用鎳螯閤瓊脂糖親和層析柱(Ni-NTA Agaros)純化重組蛋白,通過ELISA法檢測重組蛋白的免疫反應性和特異性.結果 SDS -PAGE鑒定結果錶明,重組E1-1蛋白穫得瞭正確的錶達;純化的重組E1-1蛋白純度＞95％; ELISA檢測結果錶明,重組E1-1蛋白具有較優的免疫反應性和特異性.結論 成功錶達齣具有較高免疫反應性的重組E1-1蛋白,可應用于HIV體外檢測試劑.
목적 고효표체HIV-1 gp41기인편단,만족생산HIV체외검측시제적수요.방법 이함HIV-1 gp41기인적질립X1위모판,채용PCR방법확증출gp41기인,극륭입E1재체구건중조표체질립E1-1,전화E.coli BL21DE3감수태세포,경이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도후,사용얼오합경지당친화층석주(Ni-NTA Agaros)순화중조단백,통과ELISA법검측중조단백적면역반응성화특이성.결과 SDS -PAGE감정결과표명,중조E1-1단백획득료정학적표체;순화적중조E1-1단백순도＞95％; ELISA검측결과표명,중조E1-1단백구유교우적면역반응성화특이성.결론 성공표체출구유교고면역반응성적중조E1-1단백,가응용우HIV체외검측시제.
