病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2000年
2期
162-166
,共5页
马铃薯Y病毒%复制酶基因%转录%抗病性
馬鈴藷Y病毒%複製酶基因%轉錄%抗病性
마령서Y병독%복제매기인%전록%항병성
在大肠杆菌中表达了马铃薯Y病毒中国分离物(PVY-C)复制酶NIb基因,并制备了其抗血清.利用PCR定点突变方法使NIb基因移码-1位,构建了移码-1位NIb基因(UN)的植物表达载体.通过土壤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens LBA4404)介导转化烟草NC89,获得51株再生植株.对再生植株的分子检测结果表明,转基因烟草中检测到UN基因相应的RNA转录产物,推测该基因已经整合到烟草染色体中.攻毒试验发现转UN基因烟草(T0代)对两个PVY株系和烟草蚀纹病毒的抗病性与转全长、缺失5′端381bpNIb基因烟草(T2代)的相同.Western印迹试验结果表明,在本试验检测水平上,在转基因T2代烟草中未检测到NIb基因的表达产物.实验结果支持PVY-C复制酶NIb基因在转录水平上介导相对广谱抗病性的假说.
在大腸桿菌中錶達瞭馬鈴藷Y病毒中國分離物(PVY-C)複製酶NIb基因,併製備瞭其抗血清.利用PCR定點突變方法使NIb基因移碼-1位,構建瞭移碼-1位NIb基因(UN)的植物錶達載體.通過土壤農桿菌(Agrobacterium tumefaciens LBA4404)介導轉化煙草NC89,穫得51株再生植株.對再生植株的分子檢測結果錶明,轉基因煙草中檢測到UN基因相應的RNA轉錄產物,推測該基因已經整閤到煙草染色體中.攻毒試驗髮現轉UN基因煙草(T0代)對兩箇PVY株繫和煙草蝕紋病毒的抗病性與轉全長、缺失5′耑381bpNIb基因煙草(T2代)的相同.Western印跡試驗結果錶明,在本試驗檢測水平上,在轉基因T2代煙草中未檢測到NIb基因的錶達產物.實驗結果支持PVY-C複製酶NIb基因在轉錄水平上介導相對廣譜抗病性的假說.
재대장간균중표체료마령서Y병독중국분리물(PVY-C)복제매NIb기인,병제비료기항혈청.이용PCR정점돌변방법사NIb기인이마-1위,구건료이마-1위NIb기인(UN)적식물표체재체.통과토양농간균(Agrobacterium tumefaciens LBA4404)개도전화연초NC89,획득51주재생식주.대재생식주적분자검측결과표명,전기인연초중검측도UN기인상응적RNA전록산물,추측해기인이경정합도연초염색체중.공독시험발현전UN기인연초(T0대)대량개PVY주계화연초식문병독적항병성여전전장、결실5′단381bpNIb기인연초(T2대)적상동.Western인적시험결과표명,재본시험검측수평상,재전기인T2대연초중미검측도NIb기인적표체산물.실험결과지지PVY-C복제매NIb기인재전록수평상개도상대엄보항병성적가설.
