目的:建立大鼠慢性高眼压模型,观察眼压、病理和视功能改变.方法:SD大鼠45只,麻醉后使用532二极管激光行右眼角膜缘360°光凝,角膜缘激光斑为80～100个,大鼠角膜缘颞侧、颞上及颞下巩膜浅层静脉3条,每条静脉光凝3～4个斑点,功率0.45W/0.7s.左眼为对照眼,3d后测量眼压,部分眼压升高不明显者,进行同样的二次光凝.Tono-penXL眼压计监测3,7,30,60,90,180d麻醉状态下的眼压.激光术后60,180d取大鼠各5只,40g/L多聚甲醛灌注固定,摘取双侧眼球和视神经,分别进行冰冻和石蜡切片,采用HE染色、尼氏染色、甲苯胺蓝染色,光镜下观察房角变化,不同时间视网膜节细胞计数,比较视神经髓鞘密度的变化.60,180d大鼠10只,使用TEC-350V视觉电生理仪行F-VEP检查;然后6mo大鼠5只,进行逆行荧光金标记RGCs,7d后40g/L多聚甲醛灌注固定,全视网膜铺片,荧光显微镜下比较视网膜节细胞数量变化.结果:大鼠高眼压模型成功38只,平均最高眼压在激光后30d,平均值为25.0±4.1mmHg,对照眼17.1±3.2mmHg,180d时眼压基本恢复正常.病理改变:实验眼前房角明显变窄,小梁网间隙压缩、变窄,甚至部分闭锁,消失,少量梭形成纤维细胞聚集,组织致密、硬化,而小梁细胞减少,虹膜部分卷曲,水肿、肥厚出现明显异常.逆行荧光金视网膜铺片和视网膜切片尼氏染色见实验眼视网膜节细胞数量有明显的减少;尼氏染色切片每400倍视野总平均数,60d组对照眼为41±10.6个,实验眼为35±11.2个,180d组对照眼为40±9.8个,实验眼为34±11.0个,周边视网膜平均值减少最为显著,均值相差可达8个神经节细胞;180d时模型眼视神经甲苯胺蓝染色显示的髓鞘密度明显降低;视功能检查:高眼压大鼠模型60,180d的实验眼和对照眼均可引出典型的和重复性好的NPN波形,60d时实验眼AP1(N1-P1振幅)均值降低,为13.03±3.11ms,对照眼为21.14±3.10ms,两者具有显著性差异(P＜0.05),波幅值降低持续至180d仍未恢复;LP1(P1峰潜伏期)60d时无明显变化,180d时则明显延迟,实验眼为74.47±8.05μV,对照眼为59.73±4.16μV,与对照组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:使用532-二极管激光角巩膜缘小梁网及巩膜浅层静脉光凝能成功升高眼内压,眼压升高近8mmHg;病理显示视网膜神经节细胞数显著减少,以周边视网膜为著;视神经髓鞘密度亦显著地减少;视觉电生理检测,F-VEP的AP1振幅降低,LP1波峰潜伏期延迟非常显著.
目的:建立大鼠慢性高眼壓模型,觀察眼壓、病理和視功能改變.方法:SD大鼠45隻,痳醉後使用532二極管激光行右眼角膜緣360°光凝,角膜緣激光斑為80～100箇,大鼠角膜緣顳側、顳上及顳下鞏膜淺層靜脈3條,每條靜脈光凝3～4箇斑點,功率0.45W/0.7s.左眼為對照眼,3d後測量眼壓,部分眼壓升高不明顯者,進行同樣的二次光凝.Tono-penXL眼壓計鑑測3,7,30,60,90,180d痳醉狀態下的眼壓.激光術後60,180d取大鼠各5隻,40g/L多聚甲醛灌註固定,摘取雙側眼毬和視神經,分彆進行冰凍和石蠟切片,採用HE染色、尼氏染色、甲苯胺藍染色,光鏡下觀察房角變化,不同時間視網膜節細胞計數,比較視神經髓鞘密度的變化.60,180d大鼠10隻,使用TEC-350V視覺電生理儀行F-VEP檢查;然後6mo大鼠5隻,進行逆行熒光金標記RGCs,7d後40g/L多聚甲醛灌註固定,全視網膜鋪片,熒光顯微鏡下比較視網膜節細胞數量變化.結果:大鼠高眼壓模型成功38隻,平均最高眼壓在激光後30d,平均值為25.0±4.1mmHg,對照眼17.1±3.2mmHg,180d時眼壓基本恢複正常.病理改變:實驗眼前房角明顯變窄,小樑網間隙壓縮、變窄,甚至部分閉鎖,消失,少量梭形成纖維細胞聚集,組織緻密、硬化,而小樑細胞減少,虹膜部分捲麯,水腫、肥厚齣現明顯異常.逆行熒光金視網膜鋪片和視網膜切片尼氏染色見實驗眼視網膜節細胞數量有明顯的減少;尼氏染色切片每400倍視野總平均數,60d組對照眼為41±10.6箇,實驗眼為35±11.2箇,180d組對照眼為40±9.8箇,實驗眼為34±11.0箇,週邊視網膜平均值減少最為顯著,均值相差可達8箇神經節細胞;180d時模型眼視神經甲苯胺藍染色顯示的髓鞘密度明顯降低;視功能檢查:高眼壓大鼠模型60,180d的實驗眼和對照眼均可引齣典型的和重複性好的NPN波形,60d時實驗眼AP1(N1-P1振幅)均值降低,為13.03±3.11ms,對照眼為21.14±3.10ms,兩者具有顯著性差異(P＜0.05),波幅值降低持續至180d仍未恢複;LP1(P1峰潛伏期)60d時無明顯變化,180d時則明顯延遲,實驗眼為74.47±8.05μV,對照眼為59.73±4.16μV,與對照組比較有顯著性差異(P＜0.05).結論:使用532-二極管激光角鞏膜緣小樑網及鞏膜淺層靜脈光凝能成功升高眼內壓,眼壓升高近8mmHg;病理顯示視網膜神經節細胞數顯著減少,以週邊視網膜為著;視神經髓鞘密度亦顯著地減少;視覺電生理檢測,F-VEP的AP1振幅降低,LP1波峰潛伏期延遲非常顯著.
목적:건립대서만성고안압모형,관찰안압、병리화시공능개변.방법:SD대서45지,마취후사용532이겁관격광행우안각막연360°광응,각막연격광반위80～100개,대서각막연섭측、섭상급섭하공막천층정맥3조,매조정맥광응3～4개반점,공솔0.45W/0.7s.좌안위대조안,3d후측량안압,부분안압승고불명현자,진행동양적이차광응.Tono-penXL안압계감측3,7,30,60,90,180d마취상태하적안압.격광술후60,180d취대서각5지,40g/L다취갑철관주고정,적취쌍측안구화시신경,분별진행빙동화석사절편,채용HE염색、니씨염색、갑분알람염색,광경하관찰방각변화,불동시간시망막절세포계수,비교시신경수초밀도적변화.60,180d대서10지,사용TEC-350V시각전생리의행F-VEP검사;연후6mo대서5지,진행역행형광금표기RGCs,7d후40g/L다취갑철관주고정,전시망막포편,형광현미경하비교시망막절세포수량변화.결과:대서고안압모형성공38지,평균최고안압재격광후30d,평균치위25.0±4.1mmHg,대조안17.1±3.2mmHg,180d시안압기본회복정상.병리개변:실험안전방각명현변착,소량망간극압축、변착,심지부분폐쇄,소실,소량사형성섬유세포취집,조직치밀、경화,이소량세포감소,홍막부분권곡,수종、비후출현명현이상.역행형광금시망막포편화시망막절편니씨염색견실험안시망막절세포수량유명현적감소;니씨염색절편매400배시야총평균수,60d조대조안위41±10.6개,실험안위35±11.2개,180d조대조안위40±9.8개,실험안위34±11.0개,주변시망막평균치감소최위현저,균치상차가체8개신경절세포;180d시모형안시신경갑분알람염색현시적수초밀도명현강저;시공능검사:고안압대서모형60,180d적실험안화대조안균가인출전형적화중복성호적NPN파형,60d시실험안AP1(N1-P1진폭)균치강저,위13.03±3.11ms,대조안위21.14±3.10ms,량자구유현저성차이(P＜0.05),파폭치강저지속지180d잉미회복;LP1(P1봉잠복기)60d시무명현변화,180d시칙명현연지,실험안위74.47±8.05μV,대조안위59.73±4.16μV,여대조조비교유현저성차이(P＜0.05).결론:사용532-이겁관격광각공막연소량망급공막천층정맥광응능성공승고안내압,안압승고근8mmHg;병리현시시망막신경절세포수현저감소,이주변시망막위저;시신경수초밀도역현저지감소;시각전생리검측,F-VEP적AP1진폭강저,LP1파봉잠복기연지비상현저.
