生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
1期
159-163
,共5页
徐向荣%马国昌%王昌梅%单剑峰%沈玲%黄岩山%周金宝
徐嚮榮%馬國昌%王昌梅%單劍峰%瀋玲%黃巖山%週金寶
서향영%마국창%왕창매%단검봉%침령%황암산%주금보
人血清白蛋白%干扰素α2b%柱层析%内毒素
人血清白蛋白%榦擾素α2b%柱層析%內毒素
인혈청백단백%간우소α2b%주층석%내독소
用柱层析方法在生产重组人血清白蛋白干扰素α2b融合蛋白过程中去除产品中的内毒素.所用柱层析组合为Blue-sepharose亲和柱层析、SOURCE 15 ISO疏水柱层析、Q Sepharose F.F.离子交换柱层析、Sephadex G25 Coarse凝胶过滤柱.采用鲎试剂法检测柱层析各阶段得到蛋白中的内毒素含量;并用RP-HPLC方法测定柱层析各阶段得到蛋白的纯度与浓度,求出每毫克蛋白的内毒素含量.结果为每步柱层析过程式均有去除内毒素的作用,最终所得蛋白的内毒素含量降为1 EU/mg,去除率达到99.9%.因而生产重组人血清白蛋白干扰素α2b融合蛋白所用分离纯化柱层析技术在纯化蛋白的同时能有效的去除产品中内毒素,所得产品内毒素的含量远低于药典对注射剂的内毒素含量要求.
用柱層析方法在生產重組人血清白蛋白榦擾素α2b融閤蛋白過程中去除產品中的內毒素.所用柱層析組閤為Blue-sepharose親和柱層析、SOURCE 15 ISO疏水柱層析、Q Sepharose F.F.離子交換柱層析、Sephadex G25 Coarse凝膠過濾柱.採用鱟試劑法檢測柱層析各階段得到蛋白中的內毒素含量;併用RP-HPLC方法測定柱層析各階段得到蛋白的純度與濃度,求齣每毫剋蛋白的內毒素含量.結果為每步柱層析過程式均有去除內毒素的作用,最終所得蛋白的內毒素含量降為1 EU/mg,去除率達到99.9%.因而生產重組人血清白蛋白榦擾素α2b融閤蛋白所用分離純化柱層析技術在純化蛋白的同時能有效的去除產品中內毒素,所得產品內毒素的含量遠低于藥典對註射劑的內毒素含量要求.
용주층석방법재생산중조인혈청백단백간우소α2b융합단백과정중거제산품중적내독소.소용주층석조합위Blue-sepharose친화주층석、SOURCE 15 ISO소수주층석、Q Sepharose F.F.리자교환주층석、Sephadex G25 Coarse응효과려주.채용후시제법검측주층석각계단득도단백중적내독소함량;병용RP-HPLC방법측정주층석각계단득도단백적순도여농도,구출매호극단백적내독소함량.결과위매보주층석과정식균유거제내독소적작용,최종소득단백적내독소함량강위1 EU/mg,거제솔체도99.9%.인이생산중조인혈청백단백간우소α2b융합단백소용분리순화주층석기술재순화단백적동시능유효적거제산품중내독소,소득산품내독소적함량원저우약전대주사제적내독소함량요구.
