CAJ | 학술논문

从自然感染病羊肝内收集细粒棘球绦虫(Eg)原头蚴,分别提取总RNA和基因组DNA.根据GenBank数据库中的细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)基因序列设计1对引物,以总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出EgTPx基因片段,同时以基因组DNA为模板扩增出对应的基因组序列.PCR产物经纯化后连接到pMDl8-T载体,转化至大肠杆菌DH5a后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明,成功扩增到中国青海株细粒棘球绦虫EgTPx基因片段,其开放阅读框为582 bp,编码193个氨基酸,与已知的EgTPx基因核苷酸序列及其编码蛋白氨基酸序列的同源性均为99%,有3个碱基发生变异,分别在245,306,318位由C变为T;引起1个氨基酸变异,由Ala82变为Val82.EgTPx具有典型的2-Cys型过氧化物氧还蛋白催化性位点Cys48和Cys169,以及周围保守的FVCP和VCPA序列.EgTPx基因的开放阅读框对应的基因组序列包含2个外显子和1个69 bp的内含子.
종자연감염병양간내수집세립극구조충(Eg)원두유,분별제취총RNA화기인조DNA.근거GenBank수거고중적세립극구조충류양환단백과양화물매(EgTPx)기인서렬설계1대인물,이총RNA위모판,채용RT-PCR기술확증출EgTPx기인편단,동시이기인조DNA위모판확증출대응적기인조서렬.PCR산물경순화후련접도pMDl8-T재체,전화지대장간균DH5a후,진행서렬측정화생물신식학분석.결과표명,성공확증도중국청해주세립극구조충EgTPx기인편단,기개방열독광위582 bp,편마193개안기산,여이지적EgTPx기인핵감산서렬급기편마단백안기산서렬적동원성균위99%,유3개감기발생변이,분별재245,306,318위유C변위T;인기1개안기산변이,유Ala82변위Val82.EgTPx구유전형적2-Cys형과양화물양환단백최화성위점Cys48화Cys169,이급주위보수적FVCP화VCPA서렬.EgTPx기인적개방열독광대응적기인조서렬포함2개외현자화1개69 bp적내함자.