CAJ | 학술논문

目的以弓形虫多表位抗原基因(MAG)和截短的速殖子主要表面抗原1(tSAG1)为插入子建立优化的番茄遗传转化筛选及其子代选育体系.方法从培养基激素配方、番茄外植体选择等方面进行番茄再生体系的优化.白番茄品种、外植体选材、培养温度、培养基激素配方以及在共培养时是否加入乙酰丁香酮(AS)等进行以农杆菌介导的番茄基因组稳定转化体系的优化.采用不同浓度卡那霉素抗性压力对转基因小苗进行根筛选诱导的比对.转基因番茄幼苗练莆移栽开花结果后收集种子.以无菌播种卡那霉素抗性筛选法进行番茄转基因植株子代的选育.结果子叶较下胚轴具有更强的再生能力,在优化的番茄再生培养基ZB3中,番茄子叶可达到98%(59/60)的高频再生芽萌发率.番茄的转化体系优化,培养基激素配方、培养温度是番茄转化芽诱导过程中的关键影响因素,(23±1)℃能显著提高转化芽的萌发率,AS的施加亦能显著提高番茄转化芽萌发率,Zhongshu No.5番茄子叶于ZB2培养基和(23±1)℃的条件下转化芽萌发率为35%(28/81).80 mg/L卡那霉素抗性进行HK种番茄转化小苗根的筛选诱导比较适宜,生根率为48%(31/65).抗性苗移栽成活.正常开花结果的转化植株117株.无菌播种,卡那霉素浓度≥100mg/L时能显著抑制非转基因番茄种子的发育尤其足根的萌发与植株的伸长.根出现紫化且无侧根生长:将转基因番茄种子置于150mg/L卡那霉素抗性浓度下培养,能有效进行转基因植株后代遗传分离的选育.结论成功建立番茄高频再生体系以及优化的番茄转化、抗性筛选及其转基因植株子代的选育体系.
목적 이궁형충다표위항원기인(MAG)화절단적속식자주요표면항원1(tSAG1)위삽입자건립우화적번가유전전화사선급기자대선육체계.방법 종배양기격소배방、번가외식체선택등방면진행번가재생체계적우화.백번가품충、외식체선재、배양온도、배양기격소배방이급재공배양시시부가입을선정향동(AS)등진행이농간균개도적번가기인조은정전화체계적우화.채용불동농도잡나매소항성압력대전기인소묘진행근사선유도적비대.전기인번가유묘련보이재개화결과후수집충자.이무균파충잡나매소항성사선법진행번가전기인식주자대적선육.결과 자협교하배축구유경강적재생능력,재우화적번가재생배양기ZB3중,번가자협가체도98%(59/60)적고빈재생아맹발솔.번가적전화체계우화,배양기격소배방、배양온도시번가전화아유도과정중적관건영향인소,(23±1)℃능현저제고전화아적맹발솔,AS적시가역능현저제고번가전화아맹발솔,Zhongshu No.5번가자협우ZB2배양기화(23±1)℃적조건하전화아맹발솔위35%(28/81).80 mg/L잡나매소항성진행HK충번가전화소묘근적사선유도비교괄의,생근솔위48%(31/65).항성묘이재성활.정상개화결과적전화식주117주.무균파충,잡나매소농도≥100mg/L시능현저억제비전기인번가충자적발육우기족근적맹발여식주적신장.근출현자화차무측근생장:장전기인번가충자치우150mg/L잡나매소항성농도하배양,능유효진행전기인식주후대유전분리적선육.결론 성공건립번가고빈재생체계이급우화적번가전화、항성사선급기전기인식주자대적선육체계.