中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2009年
1期
24-28
,共5页
徐斌%居小萍%经纬%陈樱
徐斌%居小萍%經緯%陳櫻
서빈%거소평%경위%진앵
融合蛋白%SDF-1%GM-CSF%辐射损伤%造血%肿瘤免疫
融閤蛋白%SDF-1%GM-CSF%輻射損傷%造血%腫瘤免疫
융합단백%SDF-1%GM-CSF%복사손상%조혈%종류면역
目的: 利用毕赤酵母表达系统表达mSDF-1γ/GM-CSF融合蛋白,研究该融合蛋白对辐射小鼠的促造血增殖作用和免疫增强作用.方法:化学合成mSDF-1γ/GM-CS基因,构建携带该基因的表达载体,转化酵母后分泌表达重组融合蛋白,离子交换柱纯化,SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定.60Co γ射线照射制备小鼠辐射模型,以融合蛋白皮下注射进行治疗,观察辐射小鼠骨髓造血细胞的增殖活性及免疫细胞的趋化活性.结果:成功构建表达载体pPIC9K- SDF1-rh-GM-CSF1,转化毕赤酵母菌株GS115后表达融合蛋白mSDF-1γ/GM-CS,其相对分子质量为32 000,含量为78 ng/ml.融合蛋白治疗后,辐射小鼠骨髓单个核细胞增殖活性、GM-CFU形成能力明显提高(均P<0.01)、骨髓细胞凋亡率非常明显地降低(P<0.05或P<0.01),小鼠外周血CD3+CD4+T细胞数显著高于辐射组和GM-CSF治疗组(均P<0.05).结论: mSDF-1γ/GM-CSF融合蛋白具有促进造血和免疫细胞增殖的双重活性,有望在抗肿瘤免疫和造血调控中开发成为有应用前景的新型细胞因子.
目的: 利用畢赤酵母錶達繫統錶達mSDF-1γ/GM-CSF融閤蛋白,研究該融閤蛋白對輻射小鼠的促造血增殖作用和免疫增彊作用.方法:化學閤成mSDF-1γ/GM-CS基因,構建攜帶該基因的錶達載體,轉化酵母後分泌錶達重組融閤蛋白,離子交換柱純化,SDS-PAGE和Western blotting分析鑒定.60Co γ射線照射製備小鼠輻射模型,以融閤蛋白皮下註射進行治療,觀察輻射小鼠骨髓造血細胞的增殖活性及免疫細胞的趨化活性.結果:成功構建錶達載體pPIC9K- SDF1-rh-GM-CSF1,轉化畢赤酵母菌株GS115後錶達融閤蛋白mSDF-1γ/GM-CS,其相對分子質量為32 000,含量為78 ng/ml.融閤蛋白治療後,輻射小鼠骨髓單箇覈細胞增殖活性、GM-CFU形成能力明顯提高(均P<0.01)、骨髓細胞凋亡率非常明顯地降低(P<0.05或P<0.01),小鼠外週血CD3+CD4+T細胞數顯著高于輻射組和GM-CSF治療組(均P<0.05).結論: mSDF-1γ/GM-CSF融閤蛋白具有促進造血和免疫細胞增殖的雙重活性,有望在抗腫瘤免疫和造血調控中開髮成為有應用前景的新型細胞因子.
목적: 이용필적효모표체계통표체mSDF-1γ/GM-CSF융합단백,연구해융합단백대복사소서적촉조혈증식작용화면역증강작용.방법:화학합성mSDF-1γ/GM-CS기인,구건휴대해기인적표체재체,전화효모후분비표체중조융합단백,리자교환주순화,SDS-PAGE화Western blotting분석감정.60Co γ사선조사제비소서복사모형,이융합단백피하주사진행치료,관찰복사소서골수조혈세포적증식활성급면역세포적추화활성.결과:성공구건표체재체pPIC9K- SDF1-rh-GM-CSF1,전화필적효모균주GS115후표체융합단백mSDF-1γ/GM-CS,기상대분자질량위32 000,함량위78 ng/ml.융합단백치료후,복사소서골수단개핵세포증식활성、GM-CFU형성능력명현제고(균P<0.01)、골수세포조망솔비상명현지강저(P<0.05혹P<0.01),소서외주혈CD3+CD4+T세포수현저고우복사조화GM-CSF치료조(균P<0.05).결론: mSDF-1γ/GM-CSF융합단백구유촉진조혈화면역세포증식적쌍중활성,유망재항종류면역화조혈조공중개발성위유응용전경적신형세포인자.
