上海医学
上海醫學
상해의학
SHANGHAI MEDICAL JOURNAL
2009年
4期
308-311
,共4页
娄小燕%孙爱军%王克强%邹云增%葛均波
婁小燕%孫愛軍%王剋彊%鄒雲增%葛均波
루소연%손애군%왕극강%추운증%갈균파
电转染%衰老%P16
電轉染%衰老%P16
전전염%쇠로%P16
目的 观察NucleofectorTM电转染技术对人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)衰老进程的影响.方法 取年轻代数的MRC-5细胞(30代),分为3组,第1组为正常培养对照组,第2组为未加质粒电转对照组,第3组为空质粒EGFP-N1电转组.采用NucleofectorTM电转仪配合试剂盒用U-023程序进行电转,计算细胞衰老相关SA-β-半乳糖苷酶(gal)阳性率,分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法分别测定p16 mRNA、P16蛋白的表达.结果 ①第1组的SA-β-gal阳性率为(9.01±0.65)%,显著低于第2组的(32.00±0.31)%和第3组的(31.13±1.62)%(P值均<0.01),后两组间的差异无统计学意义(P0.05).②第2组、第3组的p16 mRNA、P16蛋白均显著高于第1组(P值均<0.05),第2组与第3组间的差异无统计学意义(P值均0.05).结论 NucleofectorTM电转方法 可促进人MRC-5的衰老,此作用可能是通过上调P16蛋白的表达来实现的.
目的 觀察NucleofectorTM電轉染技術對人胚肺二倍體成纖維細胞(MRC-5)衰老進程的影響.方法 取年輕代數的MRC-5細胞(30代),分為3組,第1組為正常培養對照組,第2組為未加質粒電轉對照組,第3組為空質粒EGFP-N1電轉組.採用NucleofectorTM電轉儀配閤試劑盒用U-023程序進行電轉,計算細胞衰老相關SA-β-半乳糖苷酶(gal)暘性率,分彆採用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Western印跡法分彆測定p16 mRNA、P16蛋白的錶達.結果 ①第1組的SA-β-gal暘性率為(9.01±0.65)%,顯著低于第2組的(32.00±0.31)%和第3組的(31.13±1.62)%(P值均<0.01),後兩組間的差異無統計學意義(P0.05).②第2組、第3組的p16 mRNA、P16蛋白均顯著高于第1組(P值均<0.05),第2組與第3組間的差異無統計學意義(P值均0.05).結論 NucleofectorTM電轉方法 可促進人MRC-5的衰老,此作用可能是通過上調P16蛋白的錶達來實現的.
목적 관찰NucleofectorTM전전염기술대인배폐이배체성섬유세포(MRC-5)쇠로진정적영향.방법 취년경대수적MRC-5세포(30대),분위3조,제1조위정상배양대조조,제2조위미가질립전전대조조,제3조위공질립EGFP-N1전전조.채용NucleofectorTM전전의배합시제합용U-023정서진행전전,계산세포쇠로상관SA-β-반유당감매(gal)양성솔,분별채용역전록-취합매련반응(RT-PCR)화Western인적법분별측정p16 mRNA、P16단백적표체.결과 ①제1조적SA-β-gal양성솔위(9.01±0.65)%,현저저우제2조적(32.00±0.31)%화제3조적(31.13±1.62)%(P치균<0.01),후량조간적차이무통계학의의(P0.05).②제2조、제3조적p16 mRNA、P16단백균현저고우제1조(P치균<0.05),제2조여제3조간적차이무통계학의의(P치균0.05).결론 NucleofectorTM전전방법 가촉진인MRC-5적쇠로,차작용가능시통과상조P16단백적표체래실현적.
