中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2009年
8期
768-771
,共4页
彭净%叶彬%武卫华%葛璞
彭淨%葉彬%武衛華%葛璞
팽정%협빈%무위화%갈박
弓形虫%人乳腺癌细胞MCF-7%细胞凋亡
弓形蟲%人乳腺癌細胞MCF-7%細胞凋亡
궁형충%인유선암세포MCF-7%세포조망
目的 观察体外培养条件下弓形虫培养上清对乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖及其诱导其凋亡的情况.方法 取对数生长期的MCF-7细胞(浓度为5×104 和5×105)分别接种于不同细胞培养板,加入相同体积不同浓度弓形虫速殖子培养上清(速殖子浓度分别为2×107/mL、 4×107 / mL、 6×107 / mL、 8×107 / mL)与培养液共同作用12h、24h、48h、72h,四甲基氮噻唑蓝(MTT)法检测吸光度(A490值)并计算抑制率;Annexin-v-FITC/PI染色细胞后上流式细胞仪检测细胞凋亡率;AO/EB染料染色作用后细胞在荧光显微镜下观察细胞形态改变情况并拍照;琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡DNA条带.结果 MTT法检测结果 显示MCF-7细胞增殖抑制率随着上清浓度和作用时间增加均明显增大,各实验组抑制率与对照组比较以及对照组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测显示MCF-7细胞凋亡率随着上清浓度和作用时间增加明显增大,48h达到凋亡最高值(19.79%),48h后凋亡率开始下降,死亡率增加;荧光显微镜观察实验组培养48h的MCF-7细胞,出现细胞核固缩及凋亡小体,对照组未出现凋亡小体.琼脂糖凝胶电泳见DNA梯形条带.结论 弓形虫速殖子对体外培养MCF-7细胞增殖有明显的抑制作用,并可诱导MCF-7细胞凋亡.
目的 觀察體外培養條件下弓形蟲培養上清對乳腺癌細胞MCF-7細胞增殖及其誘導其凋亡的情況.方法 取對數生長期的MCF-7細胞(濃度為5×104 和5×105)分彆接種于不同細胞培養闆,加入相同體積不同濃度弓形蟲速殖子培養上清(速殖子濃度分彆為2×107/mL、 4×107 / mL、 6×107 / mL、 8×107 / mL)與培養液共同作用12h、24h、48h、72h,四甲基氮噻唑藍(MTT)法檢測吸光度(A490值)併計算抑製率;Annexin-v-FITC/PI染色細胞後上流式細胞儀檢測細胞凋亡率;AO/EB染料染色作用後細胞在熒光顯微鏡下觀察細胞形態改變情況併拍照;瓊脂糖凝膠電泳觀察細胞凋亡DNA條帶.結果 MTT法檢測結果 顯示MCF-7細胞增殖抑製率隨著上清濃度和作用時間增加均明顯增大,各實驗組抑製率與對照組比較以及對照組之間比較差異均有統計學意義(P<0.05).流式細胞儀檢測顯示MCF-7細胞凋亡率隨著上清濃度和作用時間增加明顯增大,48h達到凋亡最高值(19.79%),48h後凋亡率開始下降,死亡率增加;熒光顯微鏡觀察實驗組培養48h的MCF-7細胞,齣現細胞覈固縮及凋亡小體,對照組未齣現凋亡小體.瓊脂糖凝膠電泳見DNA梯形條帶.結論 弓形蟲速殖子對體外培養MCF-7細胞增殖有明顯的抑製作用,併可誘導MCF-7細胞凋亡.
목적 관찰체외배양조건하궁형충배양상청대유선암세포MCF-7세포증식급기유도기조망적정황.방법 취대수생장기적MCF-7세포(농도위5×104 화5×105)분별접충우불동세포배양판,가입상동체적불동농도궁형충속식자배양상청(속식자농도분별위2×107/mL、 4×107 / mL、 6×107 / mL、 8×107 / mL)여배양액공동작용12h、24h、48h、72h,사갑기담새서람(MTT)법검측흡광도(A490치)병계산억제솔;Annexin-v-FITC/PI염색세포후상류식세포의검측세포조망솔;AO/EB염료염색작용후세포재형광현미경하관찰세포형태개변정황병박조;경지당응효전영관찰세포조망DNA조대.결과 MTT법검측결과 현시MCF-7세포증식억제솔수착상청농도화작용시간증가균명현증대,각실험조억제솔여대조조비교이급대조조지간비교차이균유통계학의의(P<0.05).류식세포의검측현시MCF-7세포조망솔수착상청농도화작용시간증가명현증대,48h체도조망최고치(19.79%),48h후조망솔개시하강,사망솔증가;형광현미경관찰실험조배양48h적MCF-7세포,출현세포핵고축급조망소체,대조조미출현조망소체.경지당응효전영견DNA제형조대.결론 궁형충속식자대체외배양MCF-7세포증식유명현적억제작용,병가유도MCF-7세포조망.