食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2010年
20期
293-297
,共5页
徐义刚%崔丽春%李苏龙%曹际娟%姜艳春%张子群%刘新亮
徐義剛%崔麗春%李囌龍%曹際娟%薑豔春%張子群%劉新亮
서의강%최려춘%리소룡%조제연%강염춘%장자군%류신량
致腹泻性大肠杆菌%聚合酶链式反应%变性高效液相色谱%检测
緻腹瀉性大腸桿菌%聚閤酶鏈式反應%變性高效液相色譜%檢測
치복사성대장간균%취합매련식반응%변성고효액상색보%검측
肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)和肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)是引起腹泻、危害食品安全和人类健康的4种主要大肠杆菌.本实验基于ETEC LT基因、EPEC bfpA基因、EHEC O抗原基因和EIEC侵袭性质粒基因序列,设计了4对特异性引物,利用聚合酶链反应(PCR)和变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术,通过体系优化,建立了致腹泻性大肠杆菌多重PCR-DHPLC检测方法,达到同时检测4种致病菌的目的.该方法灵敏度高,最低检测限为EHEC 6×101拷贝/μL、ETEC 1.3 × 102拷贝/μL、EPEC 9×101拷贝/μL、EIEC 7×101拷贝/μL.特异性试验表明,对22种共41株细菌进行检测,所试6株致腹泻性大肠杆菌均为阳性.实践证明,该方法具有良好的实用性,可用于ETEC、EPEC、EHEC和EIEC的单一或混合感染的检测.
腸齣血性大腸桿菌(EHEC)、腸緻病性大腸桿菌(EPEC)、產腸毒素性大腸桿菌(ETEC)和腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)是引起腹瀉、危害食品安全和人類健康的4種主要大腸桿菌.本實驗基于ETEC LT基因、EPEC bfpA基因、EHEC O抗原基因和EIEC侵襲性質粒基因序列,設計瞭4對特異性引物,利用聚閤酶鏈反應(PCR)和變性高效液相色譜(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技術,通過體繫優化,建立瞭緻腹瀉性大腸桿菌多重PCR-DHPLC檢測方法,達到同時檢測4種緻病菌的目的.該方法靈敏度高,最低檢測限為EHEC 6×101拷貝/μL、ETEC 1.3 × 102拷貝/μL、EPEC 9×101拷貝/μL、EIEC 7×101拷貝/μL.特異性試驗錶明,對22種共41株細菌進行檢測,所試6株緻腹瀉性大腸桿菌均為暘性.實踐證明,該方法具有良好的實用性,可用于ETEC、EPEC、EHEC和EIEC的單一或混閤感染的檢測.
장출혈성대장간균(EHEC)、장치병성대장간균(EPEC)、산장독소성대장간균(ETEC)화장침습성대장간균(EIEC)시인기복사、위해식품안전화인류건강적4충주요대장간균.본실험기우ETEC LT기인、EPEC bfpA기인、EHEC O항원기인화EIEC침습성질립기인서렬,설계료4대특이성인물,이용취합매련반응(PCR)화변성고효액상색보(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)기술,통과체계우화,건립료치복사성대장간균다중PCR-DHPLC검측방법,체도동시검측4충치병균적목적.해방법령민도고,최저검측한위EHEC 6×101고패/μL、ETEC 1.3 × 102고패/μL、EPEC 9×101고패/μL、EIEC 7×101고패/μL.특이성시험표명,대22충공41주세균진행검측,소시6주치복사성대장간균균위양성.실천증명,해방법구유량호적실용성,가용우ETEC、EPEC、EHEC화EIEC적단일혹혼합감염적검측.
