中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
5期
370-373
,共4页
董炳梅%唐娜%王金良%苗立中%沈志强
董炳梅%唐娜%王金良%苗立中%瀋誌彊
동병매%당나%왕금량%묘립중%침지강
胞内劳森氏茵%猪增生性肠炎%PCR%固相吸附法
胞內勞森氏茵%豬增生性腸炎%PCR%固相吸附法
포내로삼씨인%저증생성장염%PCR%고상흡부법
为建立一种适用于临床检测胞内劳森氏茵(Lawsonia intracellularis,LI)的检测方法,本研究通过比较提取粪便样品基因组DNA的不同方法,结合PCR方法特异性扩增aspA基因检测临床样品中的LI.敏感性试验表明,阳性样本最低检出量为1.7×102 copie/μL;特异性试验表明,该方法对大肠杆菌、沙门氏茵、流行性腹泻病毒和伪狂犬病病毒扩增结果均为阴性;对102份临床样品阳性检出率为12.75%,与ELISA试剂盒检测结果符合率达88.04%;不同方法提取粪便样品基因组DNA对PCR检测敏感性的影响结果表明,固相吸附法最低检出量为2.9×102copies/μL,显著优于Chelex-100+Triton X-100法(3.32×103copie/μL)和蛋白酶K-CTAB法(2.45×106copie/μL).因此,固相吸附法结合PCR方法进行检测具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,适用于猪增生性肠炎的临床发病诊断及流行病学监测.
為建立一種適用于臨床檢測胞內勞森氏茵(Lawsonia intracellularis,LI)的檢測方法,本研究通過比較提取糞便樣品基因組DNA的不同方法,結閤PCR方法特異性擴增aspA基因檢測臨床樣品中的LI.敏感性試驗錶明,暘性樣本最低檢齣量為1.7×102 copie/μL;特異性試驗錶明,該方法對大腸桿菌、沙門氏茵、流行性腹瀉病毒和偽狂犬病病毒擴增結果均為陰性;對102份臨床樣品暘性檢齣率為12.75%,與ELISA試劑盒檢測結果符閤率達88.04%;不同方法提取糞便樣品基因組DNA對PCR檢測敏感性的影響結果錶明,固相吸附法最低檢齣量為2.9×102copies/μL,顯著優于Chelex-100+Triton X-100法(3.32×103copie/μL)和蛋白酶K-CTAB法(2.45×106copie/μL).因此,固相吸附法結閤PCR方法進行檢測具有快速、特異、敏感、重複性好等優點,適用于豬增生性腸炎的臨床髮病診斷及流行病學鑑測.
위건립일충괄용우림상검측포내로삼씨인(Lawsonia intracellularis,LI)적검측방법,본연구통과비교제취분편양품기인조DNA적불동방법,결합PCR방법특이성확증aspA기인검측림상양품중적LI.민감성시험표명,양성양본최저검출량위1.7×102 copie/μL;특이성시험표명,해방법대대장간균、사문씨인、류행성복사병독화위광견병병독확증결과균위음성;대102빈림상양품양성검출솔위12.75%,여ELISA시제합검측결과부합솔체88.04%;불동방법제취분편양품기인조DNA대PCR검측민감성적영향결과표명,고상흡부법최저검출량위2.9×102copies/μL,현저우우Chelex-100+Triton X-100법(3.32×103copie/μL)화단백매K-CTAB법(2.45×106copie/μL).인차,고상흡부법결합PCR방법진행검측구유쾌속、특이、민감、중복성호등우점,괄용우저증생성장염적림상발병진단급류행병학감측.
