解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2012年
3期
312-316
,共5页
张笑坛%夏潮涌%李艳%王广%王晓钰%张兆龙%文皓旻%杨雪松
張笑罈%夏潮湧%李豔%王廣%王曉鈺%張兆龍%文皓旻%楊雪鬆
장소단%하조용%리염%왕엄%왕효옥%장조룡%문호민%양설송
Sprouty2%成纤维细胞生长因子%神经嵴细胞%迁移%电穿孔转染%免疫荧光%鸡胚
Sprouty2%成纖維細胞生長因子%神經嵴細胞%遷移%電穿孔轉染%免疫熒光%鷄胚
Sprouty2%성섬유세포생장인자%신경척세포%천이%전천공전염%면역형광%계배
目的 利用Sprouty2基因阻断成纤维细胞生长因子(FGF)信号,探讨FGF在早期鸡胚胎发育过程中对神经嵴细胞迁移的影响及其机制. 方法 通过体内培养的方法孵育鸡胚至HH9期,通过显微注射的方法将Sprouty2-绿色荧光蛋白(GFP)质粒注射入神经管腔内.实验侧使用电穿孔转染的方法转染胚胎半侧神经管,另一侧正常神经管设为对照侧.采用神经嵴细胞特异标记物HNK1免疫荧光的方法检测Sprouty2基因阻断FGF信号后是否影响胚胎头部和躯干部神经嵴细胞的迁移过程.随后,进一步通过检测神经细胞钙黏分子N-Cadherin的表达来观察细胞之间黏附作用的改变. 结果 HNK1免疫荧光检测结果显示,Sprouty2转染侧即阻断FGF信号通路后,HNK1在早期鸡胚胎的头部和躯干部的表达量均比对照侧的表达量增多；而神经细胞钙黏分子N-Cadherin检测结果表明,Sprouty2转染侧和正常对照侧N-Cadherin在头部和躯干部神经管上表达量的差异均无显著性. 结论 Sprouty2基因阻断FGF信号后,促进了早期鸡胚胎神经嵴细胞的迁移,但是FGF信号对此过程的影响可能不是由神经钙黏分子N-Cadherin介导的.
目的 利用Sprouty2基因阻斷成纖維細胞生長因子(FGF)信號,探討FGF在早期鷄胚胎髮育過程中對神經嵴細胞遷移的影響及其機製. 方法 通過體內培養的方法孵育鷄胚至HH9期,通過顯微註射的方法將Sprouty2-綠色熒光蛋白(GFP)質粒註射入神經管腔內.實驗側使用電穿孔轉染的方法轉染胚胎半側神經管,另一側正常神經管設為對照側.採用神經嵴細胞特異標記物HNK1免疫熒光的方法檢測Sprouty2基因阻斷FGF信號後是否影響胚胎頭部和軀榦部神經嵴細胞的遷移過程.隨後,進一步通過檢測神經細胞鈣黏分子N-Cadherin的錶達來觀察細胞之間黏附作用的改變. 結果 HNK1免疫熒光檢測結果顯示,Sprouty2轉染側即阻斷FGF信號通路後,HNK1在早期鷄胚胎的頭部和軀榦部的錶達量均比對照側的錶達量增多；而神經細胞鈣黏分子N-Cadherin檢測結果錶明,Sprouty2轉染側和正常對照側N-Cadherin在頭部和軀榦部神經管上錶達量的差異均無顯著性. 結論 Sprouty2基因阻斷FGF信號後,促進瞭早期鷄胚胎神經嵴細胞的遷移,但是FGF信號對此過程的影響可能不是由神經鈣黏分子N-Cadherin介導的.
목적 이용Sprouty2기인조단성섬유세포생장인자(FGF)신호,탐토FGF재조기계배태발육과정중대신경척세포천이적영향급기궤제. 방법 통과체내배양적방법부육계배지HH9기,통과현미주사적방법장Sprouty2-록색형광단백(GFP)질립주사입신경관강내.실험측사용전천공전염적방법전염배태반측신경관,령일측정상신경관설위대조측.채용신경척세포특이표기물HNK1면역형광적방법검측Sprouty2기인조단FGF신호후시부영향배태두부화구간부신경척세포적천이과정.수후,진일보통과검측신경세포개점분자N-Cadherin적표체래관찰세포지간점부작용적개변. 결과 HNK1면역형광검측결과현시,Sprouty2전염측즉조단FGF신호통로후,HNK1재조기계배태적두부화구간부적표체량균비대조측적표체량증다；이신경세포개점분자N-Cadherin검측결과표명,Sprouty2전염측화정상대조측N-Cadherin재두부화구간부신경관상표체량적차이균무현저성. 결론 Sprouty2기인조단FGF신호후,촉진료조기계배태신경척세포적천이,단시FGF신호대차과정적영향가능불시유신경개점분자N-Cadherin개도적.
