生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
3期
148-152
,共5页
田颖新%王春苗%刘雪晴%贾晓晖%贾天军
田穎新%王春苗%劉雪晴%賈曉暉%賈天軍
전영신%왕춘묘%류설청%가효휘%가천군
HeLa细胞%cDNA文库%pGBKT7-CPn0308%酵母双杂交%自激活
HeLa細胞%cDNA文庫%pGBKT7-CPn0308%酵母雙雜交%自激活
HeLa세포%cDNA문고%pGBKT7-CPn0308%효모쌍잡교%자격활
旨在利用酵母双杂交系统构建HeLa细胞的cDNA文库,并构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CPn0308.从HeLa细胞中提取总RNA,应用SMARTTM技术,构建以pGADT7-Rec为载体的HeLa细胞酵母GAL4AD融合cDNA文库.应用PCR技术扩增目的片段CPn0308,并成功克隆该基因到诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒转化酵母菌株AH109后,检测诱饵载体有无自激活和细胞毒性作用.结果显示,文库展现良好的多态性,重组诱饵载体pGBKT7-CPn0308不具有毒性且未自主激活报告基因,说明该文库和诱饵质粒可用于酵母双杂交系统.
旨在利用酵母雙雜交繫統構建HeLa細胞的cDNA文庫,併構建酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7-CPn0308.從HeLa細胞中提取總RNA,應用SMARTTM技術,構建以pGADT7-Rec為載體的HeLa細胞酵母GAL4AD融閤cDNA文庫.應用PCR技術擴增目的片段CPn0308,併成功剋隆該基因到誘餌載體pGBKT7中,將重組質粒轉化酵母菌株AH109後,檢測誘餌載體有無自激活和細胞毒性作用.結果顯示,文庫展現良好的多態性,重組誘餌載體pGBKT7-CPn0308不具有毒性且未自主激活報告基因,說明該文庫和誘餌質粒可用于酵母雙雜交繫統.
지재이용효모쌍잡교계통구건HeLa세포적cDNA문고,병구건효모쌍잡교유이재체pGBKT7-CPn0308.종HeLa세포중제취총RNA,응용SMARTTM기술,구건이pGADT7-Rec위재체적HeLa세포효모GAL4AD융합cDNA문고.응용PCR기술확증목적편단CPn0308,병성공극륭해기인도유이재체pGBKT7중,장중조질립전화효모균주AH109후,검측유이재체유무자격활화세포독성작용.결과현시,문고전현량호적다태성,중조유이재체pGBKT7-CPn0308불구유독성차미자주격활보고기인,설명해문고화유이질립가용우효모쌍잡교계통.
