CAJ | 학술논문

为了建立小麦RAPD反应的最佳体系,保证反应结果的稳定性和可靠性,寻找小麦冷暖型基因差异,降低试验成本,在相同PCR扩增程序(94 ℃预变性5 min,94 ℃变性45 s,38 ℃退火1 min,72 ℃延伸1.5 min,40个循环,72 ℃延伸10 min,4 ℃保存)下,对冷暖型小麦基因组DNA的RAPD扩增体系各参数进行比较筛选, 创建其最佳反应体系为:25 μl反应体系中,模板DNA 20 ng,10×PCR 缓冲液2.5 μl,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq酶1 U,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,ddH2O 12 μl,随机引物10 ng.
위료건립소맥RAPD반응적최가체계,보증반응결과적은정성화가고성,심조소맥랭난형기인차이,강저시험성본,재상동PCR확증정서(94 ℃예변성5 min,94 ℃변성45 s,38 ℃퇴화1 min,72 ℃연신1.5 min,40개순배,72 ℃연신10 min,4 ℃보존)하,대랭난형소맥기인조DNA적RAPD확증체계각삼수진행비교사선, 창건기최가반응체계위:25 μl반응체계중,모판DNA 20 ng,10×PCR 완충액2.5 μl,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq매1 U,Mg2+농도위2.0 mmol/L,ddH2O 12 μl,수궤인물10 ng.