药学学报
藥學學報
약학학보
ACTA PHARMACEUTICA SINICA
2007年
3期
269-273
,共5页
α-黑素细胞刺激素%类似物%亲和力%环磷酸腺苷
α-黑素細胞刺激素%類似物%親和力%環燐痠腺苷
α-흑소세포자격소%유사물%친화력%배린산선감
检测新型α-黑素细胞刺激素(α-MSH)类似物与受体的亲和力和生物学效应.构建黑皮质激素受体表达质粒,经测序鉴定后以磷酸钙-DNA共沉淀法转染HEK-293细胞,48 h后加入含900 μg·mL-1 G418的细胞维持液,稳定表达后以流式细胞仪检测.采用放射性配体结合分析测定新型α-MSH类似物对受体的亲和力,并以[3H]环磷酸腺苷(cAMP)测定盒检测新型α-MSH类似物作用细胞后的cAMP水平.结果显示,新型α-MSH类似物对MC1R,MC3R,MC4R及MC5R的抑制常数Ki分别为(0.159±0.040),(35.430±6.743),(19.293±2.780)和(2.230±0.670) nmol·L-1.其对MC1R,MC3R,MC4R及MC5R的EC50值分别为(0.45±0.07),(7.80±0.65),(2.55±0.23)和(0.33±0.09) nmol·L-1.新型α-MSH类似物是MC1R和MC5R高选择性的激动剂.
檢測新型α-黑素細胞刺激素(α-MSH)類似物與受體的親和力和生物學效應.構建黑皮質激素受體錶達質粒,經測序鑒定後以燐痠鈣-DNA共沉澱法轉染HEK-293細胞,48 h後加入含900 μg·mL-1 G418的細胞維持液,穩定錶達後以流式細胞儀檢測.採用放射性配體結閤分析測定新型α-MSH類似物對受體的親和力,併以[3H]環燐痠腺苷(cAMP)測定盒檢測新型α-MSH類似物作用細胞後的cAMP水平.結果顯示,新型α-MSH類似物對MC1R,MC3R,MC4R及MC5R的抑製常數Ki分彆為(0.159±0.040),(35.430±6.743),(19.293±2.780)和(2.230±0.670) nmol·L-1.其對MC1R,MC3R,MC4R及MC5R的EC50值分彆為(0.45±0.07),(7.80±0.65),(2.55±0.23)和(0.33±0.09) nmol·L-1.新型α-MSH類似物是MC1R和MC5R高選擇性的激動劑.
검측신형α-흑소세포자격소(α-MSH)유사물여수체적친화력화생물학효응.구건흑피질격소수체표체질립,경측서감정후이린산개-DNA공침정법전염HEK-293세포,48 h후가입함900 μg·mL-1 G418적세포유지액,은정표체후이류식세포의검측.채용방사성배체결합분석측정신형α-MSH유사물대수체적친화력,병이[3H]배린산선감(cAMP)측정합검측신형α-MSH유사물작용세포후적cAMP수평.결과현시,신형α-MSH유사물대MC1R,MC3R,MC4R급MC5R적억제상수Ki분별위(0.159±0.040),(35.430±6.743),(19.293±2.780)화(2.230±0.670) nmol·L-1.기대MC1R,MC3R,MC4R급MC5R적EC50치분별위(0.45±0.07),(7.80±0.65),(2.55±0.23)화(0.33±0.09) nmol·L-1.신형α-MSH유사물시MC1R화MC5R고선택성적격동제.
