华南预防医学
華南預防醫學
화남예방의학
SOUTH CHINA JOURNAL OF PREVENTIVE MEDICINE
2007年
4期
21-25
,共5页
张欣%倪汉忠%郑夔%柯昌文%林锦炎
張訢%倪漢忠%鄭夔%柯昌文%林錦炎
장흔%예한충%정기%가창문%림금염
正粘病毒科%多重实时PCR%TaqMan MGB探针
正粘病毒科%多重實時PCR%TaqMan MGB探針
정점병독과%다중실시PCR%TaqMan MGB탐침
目的 应用多重real-time PCR方法检测A型和B型流感病毒,探讨其在快速诊断流感病毒感染中的优越性.方法 根据A型和B型流感病毒M基因的相对保守序列,设计两套特异性引物和TaqMan MGB探针,进行多重real-time PCR检测A型和B型流感病毒.将该方法与病毒分离、免疫层析、传统RT-PCR进行比较,并对多重real-time PCR的特异性进行评估.并应用multiplex real-time PCR方法和常规的病毒分离方法对广东省流感样病例334份咽拭标本进行检测,比较其灵敏性和特异性.结果 多重real-time PCR反应可以检测到A、B型流感病毒的最低病毒量分别为10-1和10-3TCID50/反应.该方法在对流感病毒株以及其他呼吸道病毒株样品的检测中,未发现假阳性和假阴性现象,特异性为100%.该方法对334份临床标本进行检测,结果与经典检测方法(病毒分离鉴定结合血清学检测)的符合率达100%,且灵敏度明显高于病毒分离.结论 该研究建立的多重TaqMan MGB real-time PCR是一种快速、灵敏性和特异性高的流感病毒检测方法,对于流感的早期诊断及指导临床有重要意义.
目的 應用多重real-time PCR方法檢測A型和B型流感病毒,探討其在快速診斷流感病毒感染中的優越性.方法 根據A型和B型流感病毒M基因的相對保守序列,設計兩套特異性引物和TaqMan MGB探針,進行多重real-time PCR檢測A型和B型流感病毒.將該方法與病毒分離、免疫層析、傳統RT-PCR進行比較,併對多重real-time PCR的特異性進行評估.併應用multiplex real-time PCR方法和常規的病毒分離方法對廣東省流感樣病例334份嚥拭標本進行檢測,比較其靈敏性和特異性.結果 多重real-time PCR反應可以檢測到A、B型流感病毒的最低病毒量分彆為10-1和10-3TCID50/反應.該方法在對流感病毒株以及其他呼吸道病毒株樣品的檢測中,未髮現假暘性和假陰性現象,特異性為100%.該方法對334份臨床標本進行檢測,結果與經典檢測方法(病毒分離鑒定結閤血清學檢測)的符閤率達100%,且靈敏度明顯高于病毒分離.結論 該研究建立的多重TaqMan MGB real-time PCR是一種快速、靈敏性和特異性高的流感病毒檢測方法,對于流感的早期診斷及指導臨床有重要意義.
목적 응용다중real-time PCR방법검측A형화B형류감병독,탐토기재쾌속진단류감병독감염중적우월성.방법 근거A형화B형류감병독M기인적상대보수서렬,설계량투특이성인물화TaqMan MGB탐침,진행다중real-time PCR검측A형화B형류감병독.장해방법여병독분리、면역층석、전통RT-PCR진행비교,병대다중real-time PCR적특이성진행평고.병응용multiplex real-time PCR방법화상규적병독분리방법대광동성류감양병례334빈인식표본진행검측,비교기령민성화특이성.결과 다중real-time PCR반응가이검측도A、B형류감병독적최저병독량분별위10-1화10-3TCID50/반응.해방법재대류감병독주이급기타호흡도병독주양품적검측중,미발현가양성화가음성현상,특이성위100%.해방법대334빈림상표본진행검측,결과여경전검측방법(병독분리감정결합혈청학검측)적부합솔체100%,차령민도명현고우병독분리.결론 해연구건립적다중TaqMan MGB real-time PCR시일충쾌속、령민성화특이성고적류감병독검측방법,대우류감적조기진단급지도림상유중요의의.
