华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2007年
5期
571-573,封2
,共4页
聂兴草%方峰%李红%董永绥%甄宏%李革
聶興草%方峰%李紅%董永綏%甄宏%李革
섭흥초%방봉%리홍%동영수%견굉%리혁
巨细胞病毒%肝细胞%细胞嗜性%病毒感染
巨細胞病毒%肝細胞%細胞嗜性%病毒感染
거세포병독%간세포%세포기성%병독감염
目的 确定巨细胞病毒(CMV)体外能否直接攻击肝细胞,并建立肝细胞感染模型.方法 ①人肝细胞系感染:用人CMV(HCMV)AD169毒株感染正常人肝细胞系(L-02)和人胚肺成纤维细胞(HELF)与L-02共培养细胞,HC-MV感染的HELF细胞为阳性对照;②原代鼠肝细胞(PML)感染:用重组鼠CMV(MCMV)感染PML细胞.光镜观察细胞病变(CPE),电镜观察病毒颗粒,间接免疫荧光(IFA)法检测HCMV抗原;原位杂交法检测MCMV IE基因.PML性质经观察其特征性超微结构和检测培养上清白蛋白水平予以鉴定.结果 在PML细胞纯度＞95%(培养第8天)时感染病毒,3 d后＞80%细胞出现典型CPE;电镜下胞核和胞质内见大量病毒颗粒;病毒IE基因检测呈阳性.HELF细胞可被HCMV感染;而L-02细胞无论是单独,还是与HELF共培养,其病毒标志物均呈阴性,细胞结构保持正常.结论 原代鼠肝细胞体外可受到MCMV直接感染,为CMV肝炎的体外研究提供成功的肝细胞感染模型;而正常人肝细胞系不能感染HCMV,推测其表面HCMV受体发生改变或丢失.
目的 確定巨細胞病毒(CMV)體外能否直接攻擊肝細胞,併建立肝細胞感染模型.方法 ①人肝細胞繫感染:用人CMV(HCMV)AD169毒株感染正常人肝細胞繫(L-02)和人胚肺成纖維細胞(HELF)與L-02共培養細胞,HC-MV感染的HELF細胞為暘性對照;②原代鼠肝細胞(PML)感染:用重組鼠CMV(MCMV)感染PML細胞.光鏡觀察細胞病變(CPE),電鏡觀察病毒顆粒,間接免疫熒光(IFA)法檢測HCMV抗原;原位雜交法檢測MCMV IE基因.PML性質經觀察其特徵性超微結構和檢測培養上清白蛋白水平予以鑒定.結果 在PML細胞純度＞95%(培養第8天)時感染病毒,3 d後＞80%細胞齣現典型CPE;電鏡下胞覈和胞質內見大量病毒顆粒;病毒IE基因檢測呈暘性.HELF細胞可被HCMV感染;而L-02細胞無論是單獨,還是與HELF共培養,其病毒標誌物均呈陰性,細胞結構保持正常.結論 原代鼠肝細胞體外可受到MCMV直接感染,為CMV肝炎的體外研究提供成功的肝細胞感染模型;而正常人肝細胞繫不能感染HCMV,推測其錶麵HCMV受體髮生改變或丟失.
목적 학정거세포병독(CMV)체외능부직접공격간세포,병건립간세포감염모형.방법 ①인간세포계감염:용인CMV(HCMV)AD169독주감염정상인간세포계(L-02)화인배폐성섬유세포(HELF)여L-02공배양세포,HC-MV감염적HELF세포위양성대조;②원대서간세포(PML)감염:용중조서CMV(MCMV)감염PML세포.광경관찰세포병변(CPE),전경관찰병독과립,간접면역형광(IFA)법검측HCMV항원;원위잡교법검측MCMV IE기인.PML성질경관찰기특정성초미결구화검측배양상청백단백수평여이감정.결과 재PML세포순도＞95%(배양제8천)시감염병독,3 d후＞80%세포출현전형CPE;전경하포핵화포질내견대량병독과립;병독IE기인검측정양성.HELF세포가피HCMV감염;이L-02세포무론시단독,환시여HELF공배양,기병독표지물균정음성,세포결구보지정상.결론 원대서간세포체외가수도MCMV직접감염,위CMV간염적체외연구제공성공적간세포감염모형;이정상인간세포계불능감염HCMV,추측기표면HCMV수체발생개변혹주실.
