中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2009年
5期
1130-1134
,共5页
刘琳%李本尚%叶启东%何映谊%汤静燕
劉琳%李本尚%葉啟東%何映誼%湯靜燕
류림%리본상%협계동%하영의%탕정연
混合谱系白血病蛋白%多发性内分泌癌蛋白%共定位
混閤譜繫白血病蛋白%多髮性內分泌癌蛋白%共定位
혼합보계백혈병단백%다발성내분비암단백%공정위
为研究混合谱系白血病(MLL)蛋白和多发性内分泌癌蛋白(Menin)的亚细胞定位情况,探究两者之间的相互关系是否存在,分别构建了pcDNA3.1-myc-MLL和pCMV-flag-Menin重组真核表达载体.在HEK293T细胞中,分别或者同时表达Menin和MLL蛋白,通过细胞免疫荧光方法检测两种蛋白在细胞内的分布与共存关系;利用通过免疫共沉淀(Co-IP)并结合Western blot方法检测两种蛋白间的相互作用.结果表明:MLL蛋白与Menin蛋白主要在细胞核中表达,共聚焦显微镜观察显示两蛋白部分共存;Co-IP与Western blot结果显示,MLL蛋白可以在FLAG抗体的免疫沉淀物中检测出来,MYC抗体的免疫沉淀物中也能检测到蛋白Menin.结论:Menin与MLL2种蛋白在细胞中主要分布于胞核内,具有相同定位,并且存在相互作用关系.
為研究混閤譜繫白血病(MLL)蛋白和多髮性內分泌癌蛋白(Menin)的亞細胞定位情況,探究兩者之間的相互關繫是否存在,分彆構建瞭pcDNA3.1-myc-MLL和pCMV-flag-Menin重組真覈錶達載體.在HEK293T細胞中,分彆或者同時錶達Menin和MLL蛋白,通過細胞免疫熒光方法檢測兩種蛋白在細胞內的分佈與共存關繫;利用通過免疫共沉澱(Co-IP)併結閤Western blot方法檢測兩種蛋白間的相互作用.結果錶明:MLL蛋白與Menin蛋白主要在細胞覈中錶達,共聚焦顯微鏡觀察顯示兩蛋白部分共存;Co-IP與Western blot結果顯示,MLL蛋白可以在FLAG抗體的免疫沉澱物中檢測齣來,MYC抗體的免疫沉澱物中也能檢測到蛋白Menin.結論:Menin與MLL2種蛋白在細胞中主要分佈于胞覈內,具有相同定位,併且存在相互作用關繫.
위연구혼합보계백혈병(MLL)단백화다발성내분비암단백(Menin)적아세포정위정황,탐구량자지간적상호관계시부존재,분별구건료pcDNA3.1-myc-MLL화pCMV-flag-Menin중조진핵표체재체.재HEK293T세포중,분별혹자동시표체Menin화MLL단백,통과세포면역형광방법검측량충단백재세포내적분포여공존관계;이용통과면역공침정(Co-IP)병결합Western blot방법검측량충단백간적상호작용.결과표명:MLL단백여Menin단백주요재세포핵중표체,공취초현미경관찰현시량단백부분공존;Co-IP여Western blot결과현시,MLL단백가이재FLAG항체적면역침정물중검측출래,MYC항체적면역침정물중야능검측도단백Menin.결론:Menin여MLL2충단백재세포중주요분포우포핵내,구유상동정위,병차존재상호작용관계.
