华中师范大学学报（自然科学版）
華中師範大學學報（自然科學版）
화중사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF CENTRAL CHINA NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)
2010年
1期
120-124
,共5页
伍翔%祁超%李伟国%刘中来
伍翔%祁超%李偉國%劉中來
오상%기초%리위국%류중래
Fpr3%肽基脯氨酰顺反异构酶%重组检验点活性%表达%纯化%多克隆抗体
Fpr3%肽基脯氨酰順反異構酶%重組檢驗點活性%錶達%純化%多剋隆抗體
Fpr3%태기포안선순반이구매%중조검험점활성%표체%순화%다극륭항체
为了从分子水平上进一步研究PPIase与PP1的相互作用,将构建好的pGEX-5X-1重组表达质粒转化于受体菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导后得到了可溶形式表达的融合蛋白.采用GST亲和层析法对重组蛋白进行了纯化,并用Factor Xa对融合蛋白进行柱上酶切,SDS-PAGE检测表明可获得较高纯度的GST-Fpr3融合蛋白以及去除GST标签的目的蛋白.用其免疫日本雄性大耳白兔,成功制备了抗GST-Fpr3的多克隆抗体,为Fpr3的空间结构的解析和相应的分子识别过程奠定了基础.
為瞭從分子水平上進一步研究PPIase與PP1的相互作用,將構建好的pGEX-5X-1重組錶達質粒轉化于受體菌BL21(DE3)感受態細胞中,用IPTG誘導後得到瞭可溶形式錶達的融閤蛋白.採用GST親和層析法對重組蛋白進行瞭純化,併用Factor Xa對融閤蛋白進行柱上酶切,SDS-PAGE檢測錶明可穫得較高純度的GST-Fpr3融閤蛋白以及去除GST標籤的目的蛋白.用其免疫日本雄性大耳白兔,成功製備瞭抗GST-Fpr3的多剋隆抗體,為Fpr3的空間結構的解析和相應的分子識彆過程奠定瞭基礎.
위료종분자수평상진일보연구PPIase여PP1적상호작용,장구건호적pGEX-5X-1중조표체질립전화우수체균BL21(DE3)감수태세포중,용IPTG유도후득도료가용형식표체적융합단백.채용GST친화층석법대중조단백진행료순화,병용Factor Xa대융합단백진행주상매절,SDS-PAGE검측표명가획득교고순도적GST-Fpr3융합단백이급거제GST표첨적목적단백.용기면역일본웅성대이백토,성공제비료항GST-Fpr3적다극륭항체,위Fpr3적공간결구적해석화상응적분자식별과정전정료기출.
