中国生物医学工程学报
中國生物醫學工程學報
중국생물의학공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOMEDICAL ENGINEERING
2010年
3期
437-445
,共9页
吴秋云%唐萌%谢彦昕%石亚娟%杨红
吳鞦雲%唐萌%謝彥昕%石亞娟%楊紅
오추운%당맹%사언흔%석아연%양홍
纳米SiO2%RAW264.7细胞%细胞毒性%细胞膜流动性%乳酸脱氢酶(LDH)%活性氧(ROS)
納米SiO2%RAW264.7細胞%細胞毒性%細胞膜流動性%乳痠脫氫酶(LDH)%活性氧(ROS)
납미SiO2%RAW264.7세포%세포독성%세포막류동성%유산탈경매(LDH)%활성양(ROS)
探讨不同粒径纳米二氧化硅对体外培养细胞膜的损伤作用及其机制.20 nm、60 nm SiO2及微米SiO2对RAW264.7巨噬细胞染毒后,分别采用MTT法、显微镜及透射电镜、能谱分析、荧光漂白恢复技术(FRAP)、丙酮酸法、荧光探针2', 7'-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA),测定染毒细胞的活性、形态及超微结构,细胞内外Si元素分布、膜流动性,细胞外液中乳酸脱氢酶(LDH)含量和细胞内活性氧生成.试验结果显示:20 nm、60 nm SiO2及微米SiO2粒子的细胞半数抑制浓度(IC50)分别为2.07、6.82和14.71 mg/mL;染毒后细胞数量减少,呈气球样变,线粒体肿胀、破坏;细胞内吞噬泡和细胞间隙颗粒均含Si元素;31.25、125、500 μg/mL的20 nm、60 nm SiO2组及500 μg/mL微米SiO2组细胞膜荧光恢复率降低(P<0.05);125、500 μg/mL两种粒径纳米SiO2组及500 μg/mL微米SiO2组细胞膜扩散系数降低(P<0.05);两种粒径纳米SiO2组细胞外液中LDH活性升高(P<0.05),500 μg/mL的20 nm SiO2较60 nm SiO2和微米SiO2致细胞荧光恢复率降低,LDH活性升高(P<0.05);两种粒径纳米SiO2及微米SiO2可致染毒细胞内活性氧水平升高(P<0.05).结果表明,20 nm、60 nm SiO2可通过诱导脂质过氧化引起细胞生长抑制、形态异常、超微结构改变和细胞膜损伤,相同剂量20 nm SiO2产生的毒性效应较60 nm SiO2明显,说明纳米SiO2的尺寸效应是一个值得关注的问题.
探討不同粒徑納米二氧化硅對體外培養細胞膜的損傷作用及其機製.20 nm、60 nm SiO2及微米SiO2對RAW264.7巨噬細胞染毒後,分彆採用MTT法、顯微鏡及透射電鏡、能譜分析、熒光漂白恢複技術(FRAP)、丙酮痠法、熒光探針2', 7'-二乙酰二氯熒光素(DCFH-DA),測定染毒細胞的活性、形態及超微結構,細胞內外Si元素分佈、膜流動性,細胞外液中乳痠脫氫酶(LDH)含量和細胞內活性氧生成.試驗結果顯示:20 nm、60 nm SiO2及微米SiO2粒子的細胞半數抑製濃度(IC50)分彆為2.07、6.82和14.71 mg/mL;染毒後細胞數量減少,呈氣毬樣變,線粒體腫脹、破壞;細胞內吞噬泡和細胞間隙顆粒均含Si元素;31.25、125、500 μg/mL的20 nm、60 nm SiO2組及500 μg/mL微米SiO2組細胞膜熒光恢複率降低(P<0.05);125、500 μg/mL兩種粒徑納米SiO2組及500 μg/mL微米SiO2組細胞膜擴散繫數降低(P<0.05);兩種粒徑納米SiO2組細胞外液中LDH活性升高(P<0.05),500 μg/mL的20 nm SiO2較60 nm SiO2和微米SiO2緻細胞熒光恢複率降低,LDH活性升高(P<0.05);兩種粒徑納米SiO2及微米SiO2可緻染毒細胞內活性氧水平升高(P<0.05).結果錶明,20 nm、60 nm SiO2可通過誘導脂質過氧化引起細胞生長抑製、形態異常、超微結構改變和細胞膜損傷,相同劑量20 nm SiO2產生的毒性效應較60 nm SiO2明顯,說明納米SiO2的呎吋效應是一箇值得關註的問題.
탐토불동립경납미이양화규대체외배양세포막적손상작용급기궤제.20 nm、60 nm SiO2급미미SiO2대RAW264.7거서세포염독후,분별채용MTT법、현미경급투사전경、능보분석、형광표백회복기술(FRAP)、병동산법、형광탐침2', 7'-이을선이록형광소(DCFH-DA),측정염독세포적활성、형태급초미결구,세포내외Si원소분포、막류동성,세포외액중유산탈경매(LDH)함량화세포내활성양생성.시험결과현시:20 nm、60 nm SiO2급미미SiO2입자적세포반수억제농도(IC50)분별위2.07、6.82화14.71 mg/mL;염독후세포수량감소,정기구양변,선립체종창、파배;세포내탄서포화세포간극과립균함Si원소;31.25、125、500 μg/mL적20 nm、60 nm SiO2조급500 μg/mL미미SiO2조세포막형광회복솔강저(P<0.05);125、500 μg/mL량충립경납미SiO2조급500 μg/mL미미SiO2조세포막확산계수강저(P<0.05);량충립경납미SiO2조세포외액중LDH활성승고(P<0.05),500 μg/mL적20 nm SiO2교60 nm SiO2화미미SiO2치세포형광회복솔강저,LDH활성승고(P<0.05);량충립경납미SiO2급미미SiO2가치염독세포내활성양수평승고(P<0.05).결과표명,20 nm、60 nm SiO2가통과유도지질과양화인기세포생장억제、형태이상、초미결구개변화세포막손상,상동제량20 nm SiO2산생적독성효응교60 nm SiO2명현,설명납미SiO2적척촌효응시일개치득관주적문제.