中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2010年
3期
185-190,后插1
,共7页
巨向红%徐汉进%雍艳红%安立龙%效梅%许英梅
巨嚮紅%徐漢進%雍豔紅%安立龍%效梅%許英梅
거향홍%서한진%옹염홍%안립룡%효매%허영매
猪%Toll样受体%生物信息学分析
豬%Toll樣受體%生物信息學分析
저%Toll양수체%생물신식학분석
目的 研究TLR4在猪自然免疫中的作用及机制,为抗病育种及免疫佐剂的开发提供依据.方法 利用NCBI公布的TLR4基因序列设计引物,RT-PCR技术克隆巴马香猪TLR4基因.结果 所得基因序列提交GenBank,登录号:GQ304754.经序列分析,发现巴马香猪TLR4基因开放阅读框长2526 bp,编码785个氨基酸,该蛋白等电点为6.58,分子量为96.4×103;与普通猪比对发现巴马香猪TLR4基因有5个碱基发生突变;与小鼠、狗、鸡、牛、羊和人的同源性分别为71.9%、81.5%、54.2%、86.4%、85.5%和81.9%;TLR4膜外区蛋白为背侧多个α螺旋和内侧多个β折叠平行交替排列构成一个弯曲状螺旋结构;N末端存在信号肽,且可能在23~24位氨基酸处存在裂解位点;胞外区有13个明显的LRR,分别位于第53~74、77~100、101~124、149~173、174~192、201~225、372~393、398~429、446~469、470~494、495~518、519~541、543~566位氨基酸区;膜外区含8个N连接的糖基化位点.结论 本研究成功克隆巴马香猪TLR4基因,为进一步研究该基因的功能和蛋白质的特性奠定了基础.
目的 研究TLR4在豬自然免疫中的作用及機製,為抗病育種及免疫佐劑的開髮提供依據.方法 利用NCBI公佈的TLR4基因序列設計引物,RT-PCR技術剋隆巴馬香豬TLR4基因.結果 所得基因序列提交GenBank,登錄號:GQ304754.經序列分析,髮現巴馬香豬TLR4基因開放閱讀框長2526 bp,編碼785箇氨基痠,該蛋白等電點為6.58,分子量為96.4×103;與普通豬比對髮現巴馬香豬TLR4基因有5箇堿基髮生突變;與小鼠、狗、鷄、牛、羊和人的同源性分彆為71.9%、81.5%、54.2%、86.4%、85.5%和81.9%;TLR4膜外區蛋白為揹側多箇α螺鏇和內側多箇β摺疊平行交替排列構成一箇彎麯狀螺鏇結構;N末耑存在信號肽,且可能在23~24位氨基痠處存在裂解位點;胞外區有13箇明顯的LRR,分彆位于第53~74、77~100、101~124、149~173、174~192、201~225、372~393、398~429、446~469、470~494、495~518、519~541、543~566位氨基痠區;膜外區含8箇N連接的糖基化位點.結論 本研究成功剋隆巴馬香豬TLR4基因,為進一步研究該基因的功能和蛋白質的特性奠定瞭基礎.
목적 연구TLR4재저자연면역중적작용급궤제,위항병육충급면역좌제적개발제공의거.방법 이용NCBI공포적TLR4기인서렬설계인물,RT-PCR기술극륭파마향저TLR4기인.결과 소득기인서렬제교GenBank,등록호:GQ304754.경서렬분석,발현파마향저TLR4기인개방열독광장2526 bp,편마785개안기산,해단백등전점위6.58,분자량위96.4×103;여보통저비대발현파마향저TLR4기인유5개감기발생돌변;여소서、구、계、우、양화인적동원성분별위71.9%、81.5%、54.2%、86.4%、85.5%화81.9%;TLR4막외구단백위배측다개α라선화내측다개β절첩평행교체배렬구성일개만곡상라선결구;N말단존재신호태,차가능재23~24위안기산처존재렬해위점;포외구유13개명현적LRR,분별위우제53~74、77~100、101~124、149~173、174~192、201~225、372~393、398~429、446~469、470~494、495~518、519~541、543~566위안기산구;막외구함8개N련접적당기화위점.결론 본연구성공극륭파마향저TLR4기인,위진일보연구해기인적공능화단백질적특성전정료기출.