中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2011年
7期
639-641,647
,共4页
邱玉玉%李晓霞%武专昌%崔治中%孙淑红%张显忠
邱玉玉%李曉霞%武專昌%崔治中%孫淑紅%張顯忠
구옥옥%리효하%무전창%최치중%손숙홍%장현충
禽白血病病毒%AB%亚群%囊膜蛋白%单克隆抗体
禽白血病病毒%AB%亞群%囊膜蛋白%單剋隆抗體
금백혈병병독%AB%아군%낭막단백%단극륭항체
目的:制备A和B亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)特异性单克隆抗体.方法:用ALV-A-SDAU09C1株的env-gp85基因的PCR产物构建重组表达性质粒pET32a-SDAU09C1- gp85,经IPTG诱导后,表达分子量为53 kD的ALV-A囊膜gp85蛋白与GST的融合蛋白,将表达产物免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,筛选杂交瘤细胞株.结果:获得了1株(A6D1株)能与A和B亚群ALV发生反应但不与J亚群ALV反应的杂交瘤细胞株.Western blot试验结果表明,单克隆抗体识别的A和B亚群ALV囊膜糖蛋白的分子量为53 kD.在IFA中,这株单克隆抗体可以与所试验的3株ALV-A和1株ALV-B毒株反应,而与4株ALV-J亚群的毒株不反应.结论:A6D1株单克隆抗体可以用于A和B亚群ALV感染的诊断和流行病学调查,弥补了目前只有J亚群ALV特异性单克隆抗体可用的不足.
目的:製備A和B亞群禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)特異性單剋隆抗體.方法:用ALV-A-SDAU09C1株的env-gp85基因的PCR產物構建重組錶達性質粒pET32a-SDAU09C1- gp85,經IPTG誘導後,錶達分子量為53 kD的ALV-A囊膜gp85蛋白與GST的融閤蛋白,將錶達產物免疫BALB/c小鼠,取其脾髒細胞與骨髓瘤細胞SP2/0進行融閤,篩選雜交瘤細胞株.結果:穫得瞭1株(A6D1株)能與A和B亞群ALV髮生反應但不與J亞群ALV反應的雜交瘤細胞株.Western blot試驗結果錶明,單剋隆抗體識彆的A和B亞群ALV囊膜糖蛋白的分子量為53 kD.在IFA中,這株單剋隆抗體可以與所試驗的3株ALV-A和1株ALV-B毒株反應,而與4株ALV-J亞群的毒株不反應.結論:A6D1株單剋隆抗體可以用于A和B亞群ALV感染的診斷和流行病學調查,瀰補瞭目前隻有J亞群ALV特異性單剋隆抗體可用的不足.
목적:제비A화B아군금백혈병병독(Avian leukosis virus,ALV)특이성단극륭항체.방법:용ALV-A-SDAU09C1주적env-gp85기인적PCR산물구건중조표체성질립pET32a-SDAU09C1- gp85,경IPTG유도후,표체분자량위53 kD적ALV-A낭막gp85단백여GST적융합단백,장표체산물면역BALB/c소서,취기비장세포여골수류세포SP2/0진행융합,사선잡교류세포주.결과:획득료1주(A6D1주)능여A화B아군ALV발생반응단불여J아군ALV반응적잡교류세포주.Western blot시험결과표명,단극륭항체식별적A화B아군ALV낭막당단백적분자량위53 kD.재IFA중,저주단극륭항체가이여소시험적3주ALV-A화1주ALV-B독주반응,이여4주ALV-J아군적독주불반응.결론:A6D1주단극륭항체가이용우A화B아군ALV감염적진단화류행병학조사,미보료목전지유J아군ALV특이성단극륭항체가용적불족.