徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2011年
9期
594-597
,共4页
马志峰%董红燕%张志峰%袁红花%张中明
馬誌峰%董紅燕%張誌峰%袁紅花%張中明
마지봉%동홍연%장지봉%원홍화%장중명
BM-MSCs%Wnt11%BMP2%心肌微环境%诱导分化%心肌样细胞
BM-MSCs%Wnt11%BMP2%心肌微環境%誘導分化%心肌樣細胞
BM-MSCs%Wnt11%BMP2%심기미배경%유도분화%심기양세포
目的 探讨在心肌微环境的旁分泌作用中,Wnt11与BMP2对促进大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-mesenchymal stem cells,BM-MSCs)分化为心肌样细胞的协同作用.方法 建立Transwell共培养模型,将心肌细胞及转染Wnt11质粒的3T3细胞置于上层、BM-MSCs置于下层培养,前3天应用含50 μg/L Noggin(BMP抑制剂)培养液、第4天换用含0.5 μg/L BMP2的培养基诱导培养至第14天.根据不同诱导条件,培养细胞分为7组:阳性对照组(Heart组)、CM组、CM +BMP2组、CM+Wnt11组、Wnt11+BMP2组、CM+Wnt11+BMP2组、阴性对照组(BM-MSCs组).诱导培养结束后,采用RT-PCR方法,检测心肌特异性转录因子(Nkx2.5、GATA4、Mef2c)和成熟心肌细胞特异性基因(cTnI、ANP、α-MHC、β-MHC)mRNA表达水平.结果 RT-PCR结果显示,在心肌细胞旁分泌微环境下,Wnt11与BMP2协同作用组(CM+Wnt11+BMP2组)心肌特异性转录因子和成熟心肌细胞特异性基因的表达明显高于阴性对照组和其他共培养对照组,低于阳性对照组(P<0.05).结论 在心肌细胞旁分泌微环境中,Wnt11协同BMP2表达可提高BM-MSCs向心肌样细胞分化的效率.
目的 探討在心肌微環境的徬分泌作用中,Wnt11與BMP2對促進大鼠骨髓間充質榦細胞(bone marrow-mesenchymal stem cells,BM-MSCs)分化為心肌樣細胞的協同作用.方法 建立Transwell共培養模型,將心肌細胞及轉染Wnt11質粒的3T3細胞置于上層、BM-MSCs置于下層培養,前3天應用含50 μg/L Noggin(BMP抑製劑)培養液、第4天換用含0.5 μg/L BMP2的培養基誘導培養至第14天.根據不同誘導條件,培養細胞分為7組:暘性對照組(Heart組)、CM組、CM +BMP2組、CM+Wnt11組、Wnt11+BMP2組、CM+Wnt11+BMP2組、陰性對照組(BM-MSCs組).誘導培養結束後,採用RT-PCR方法,檢測心肌特異性轉錄因子(Nkx2.5、GATA4、Mef2c)和成熟心肌細胞特異性基因(cTnI、ANP、α-MHC、β-MHC)mRNA錶達水平.結果 RT-PCR結果顯示,在心肌細胞徬分泌微環境下,Wnt11與BMP2協同作用組(CM+Wnt11+BMP2組)心肌特異性轉錄因子和成熟心肌細胞特異性基因的錶達明顯高于陰性對照組和其他共培養對照組,低于暘性對照組(P<0.05).結論 在心肌細胞徬分泌微環境中,Wnt11協同BMP2錶達可提高BM-MSCs嚮心肌樣細胞分化的效率.
목적 탐토재심기미배경적방분비작용중,Wnt11여BMP2대촉진대서골수간충질간세포(bone marrow-mesenchymal stem cells,BM-MSCs)분화위심기양세포적협동작용.방법 건립Transwell공배양모형,장심기세포급전염Wnt11질립적3T3세포치우상층、BM-MSCs치우하층배양,전3천응용함50 μg/L Noggin(BMP억제제)배양액、제4천환용함0.5 μg/L BMP2적배양기유도배양지제14천.근거불동유도조건,배양세포분위7조:양성대조조(Heart조)、CM조、CM +BMP2조、CM+Wnt11조、Wnt11+BMP2조、CM+Wnt11+BMP2조、음성대조조(BM-MSCs조).유도배양결속후,채용RT-PCR방법,검측심기특이성전록인자(Nkx2.5、GATA4、Mef2c)화성숙심기세포특이성기인(cTnI、ANP、α-MHC、β-MHC)mRNA표체수평.결과 RT-PCR결과현시,재심기세포방분비미배경하,Wnt11여BMP2협동작용조(CM+Wnt11+BMP2조)심기특이성전록인자화성숙심기세포특이성기인적표체명현고우음성대조조화기타공배양대조조,저우양성대조조(P<0.05).결론 재심기세포방분비미배경중,Wnt11협동BMP2표체가제고BM-MSCs향심기양세포분화적효솔.
