生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2012年
4期
314-318
,共5页
王志强%梁锐%陈明清%董坚%邓俊%陈天星%李文亮%文政琦
王誌彊%樑銳%陳明清%董堅%鄧俊%陳天星%李文亮%文政琦
왕지강%량예%진명청%동견%산준%진천성%리문량%문정기
人孤雌胚胎干细胞%人包皮成纤维细胞%饲养层%人胚胎干细胞%细胞培养
人孤雌胚胎榦細胞%人包皮成纖維細胞%飼養層%人胚胎榦細胞%細胞培養
인고자배태간세포%인포피성섬유세포%사양층%인배태간세포%세포배양
人孤雌胚胎干细胞(human parthenogenetic embryonic stem cells,hPESCs)体外培养常需饲养层的支持以保持干细胞特性.通过原代培养获得人包皮成纤维细胞(human foreskin fibroblasts,hFFs)并将其制备成饲养层,使hPESCs在hFFs上进行体外培养及传代.倒置显微镜下观察hPESCs的生长状态,采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)检测、核型分析和体内分化实验研究hPESCs的生物学特性及分化潜能,以探索hFFs能否长期支持hPESCs的生长并维持其未分化状态.经原代培养成功获得了hFFs,通过形态学观察和免疫细胞化学染色鉴定符合成纤维细胞的生物学特性；在hFFs上生长的hPESCs克隆形态规则,不易分化；已成功在体外培养20余代,hPESCs仍能够保持基本生物学特性和正常核型,在裸鼠体内可形成含有3个胚层组织成分的畸胎瘤.作为人源性饲养层,hFFs可长期支持hPESCs的生长并维持其未分化状态.
人孤雌胚胎榦細胞(human parthenogenetic embryonic stem cells,hPESCs)體外培養常需飼養層的支持以保持榦細胞特性.通過原代培養穫得人包皮成纖維細胞(human foreskin fibroblasts,hFFs)併將其製備成飼養層,使hPESCs在hFFs上進行體外培養及傳代.倒置顯微鏡下觀察hPESCs的生長狀態,採用堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,AKP)檢測、覈型分析和體內分化實驗研究hPESCs的生物學特性及分化潛能,以探索hFFs能否長期支持hPESCs的生長併維持其未分化狀態.經原代培養成功穫得瞭hFFs,通過形態學觀察和免疫細胞化學染色鑒定符閤成纖維細胞的生物學特性；在hFFs上生長的hPESCs剋隆形態規則,不易分化；已成功在體外培養20餘代,hPESCs仍能夠保持基本生物學特性和正常覈型,在裸鼠體內可形成含有3箇胚層組織成分的畸胎瘤.作為人源性飼養層,hFFs可長期支持hPESCs的生長併維持其未分化狀態.
인고자배태간세포(human parthenogenetic embryonic stem cells,hPESCs)체외배양상수사양층적지지이보지간세포특성.통과원대배양획득인포피성섬유세포(human foreskin fibroblasts,hFFs)병장기제비성사양층,사hPESCs재hFFs상진행체외배양급전대.도치현미경하관찰hPESCs적생장상태,채용감성린산매(alkaline phosphatase,AKP)검측、핵형분석화체내분화실험연구hPESCs적생물학특성급분화잠능,이탐색hFFs능부장기지지hPESCs적생장병유지기미분화상태.경원대배양성공획득료hFFs,통과형태학관찰화면역세포화학염색감정부합성섬유세포적생물학특성；재hFFs상생장적hPESCs극륭형태규칙,불역분화；이성공재체외배양20여대,hPESCs잉능구보지기본생물학특성화정상핵형,재라서체내가형성함유3개배층조직성분적기태류.작위인원성사양층,hFFs가장기지지hPESCs적생장병유지기미분화상태.
