CAJ | 학술논문

建立并评估分别检测戊型肝炎(戊肝)病毒IgM与IgG抗体的捕获法及间接法ELISA.以原核表达的多聚化重组HEV蛋白为抗原,建立戊肝捕获法IgM ELISA(E2-IgM)和间接法IgG ELISA(E2-IgG).利用29只实验感染猴系列血清及多份临床急性肝炎血清、正常人血清以及单克隆抗体评估所建立的方法的敏感性与特异性,并与商品化试剂(Genelabs公司抗-HEV IgG和IgM试剂,GL-IgG/GL-IgM)进行比较.29只恒河猴E2-IgM和E2-IgG的阳转率均为100%,其中75%在感染后4周内阳转,均早于ALT异常时间.E2-IgM持续2～14周,平均6周;E2-IgG在70周时仍无一阴转.GL-IgG阳转率为79.3%(23/29),多数晚于ALT异常时间,平均持续约18周,但最长为1只在感染后70周时仍为阳性.用E2-IgM试剂盒检测928份正常人血清,仅2份OD值略高于0.2.检测510份临床急性肝炎血清,可明显将其区分为2个部分,一个部分OD值小于0.2,其OD值分布与正常人相似;另一个部分OD值大于0.4,共131份,其中109份大于1.0.可能分别对应于急性肝炎中的非戊肝患者和戊肝患者.119份非甲～丙急性肝炎中,E2-IgM阳性57份,GL-IgM阳性29份(E2-IgM均阳性).5 060份普通人群血清的E2-IgG OD值在0.2以下,形成一个近似对数正态峰,均值为0.022,在OD值0.4以上则分布均匀.用E2-IgG试剂检测200份临床急性肝炎血清,结果OD值0.2以下也形成一个与普通人群类似的近似对数正态峰,但OD值在大于1.0～4.0间形成另一个尖峰(峰值在OD2.5处),其中多数E2-IgM阳性.抗-HEV单抗可明显阻断E2-IgM及E2-IgG,单抗Fab段的阻断效果与完整抗体类似,提示这种阻断是表位特异的.建立的戊肝IgM试剂和IgG试剂具有良好的敏感性与特异性.IgM试剂适用于临床戊肝诊断,IgG试剂适用于既往戊肝感染诊断.
건립병평고분별검측무형간염(무간)병독IgM여IgG항체적포획법급간접법ELISA.이원핵표체적다취화중조HEV단백위항원,건립무간포획법IgM ELISA(E2-IgM)화간접법IgG ELISA(E2-IgG).이용29지실험감염후계렬혈청급다빈림상급성간염혈청、정상인혈청이급단극륭항체평고소건립적방법적민감성여특이성,병여상품화시제(Genelabs공사항-HEV IgG화IgM시제,GL-IgG/GL-IgM)진행비교.29지항하후E2-IgM화E2-IgG적양전솔균위100%,기중75%재감염후4주내양전,균조우ALT이상시간.E2-IgM지속2～14주,평균6주;E2-IgG재70주시잉무일음전.GL-IgG양전솔위79.3%(23/29),다수만우ALT이상시간,평균지속약18주,단최장위1지재감염후70주시잉위양성.용E2-IgM시제합검측928빈정상인혈청,부2빈OD치략고우0.2.검측510빈림상급성간염혈청,가명현장기구분위2개부분,일개부분OD치소우0.2,기OD치분포여정상인상사;령일개부분OD치대우0.4,공131빈,기중109빈대우1.0.가능분별대응우급성간염중적비무간환자화무간환자.119빈비갑～병급성간염중,E2-IgM양성57빈,GL-IgM양성29빈(E2-IgM균양성).5 060빈보통인군혈청적E2-IgG OD치재0.2이하,형성일개근사대수정태봉,균치위0.022,재OD치0.4이상칙분포균균.용E2-IgG시제검측200빈림상급성간염혈청,결과OD치0.2이하야형성일개여보통인군유사적근사대수정태봉,단OD치재대우1.0～4.0간형성령일개첨봉(봉치재OD2.5처),기중다수E2-IgM양성.항-HEV단항가명현조단E2-IgM급E2-IgG,단항Fab단적조단효과여완정항체유사,제시저충조단시표위특이적.건립적무간IgM시제화IgG시제구유량호적민감성여특이성.IgM시제괄용우림상무간진단,IgG시제괄용우기왕무간감염진단.