CAJ | 학술논문

目的:用多重PCR从临床标本中同时检测猪链2型特异性及5个毒力相关基因,建立SS2实验室快速诊断及应急检测的核酸鉴定方法.方法:根据已报告的引物序列设计并合成8对引物(含1对内对照引物),经过PCR反应条件的优化与组合,采用同一PCR反应条件与循环程序,直接从临床标本或培养物中同时一次性扩增属特异性(tuf)、种特异性(16S rRNA)、荚膜多糖(cps2J)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、细胞外蛋白因子(ef)、溶血素(sly)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gapdh)等基因;并对方法的特异性和敏感性进行评估.结果:运用所建立的方法可直接从临床疑似猪链感染患者的脑脊液、血液、双相培养液和血培养物中一次性扩增出上述8对引物的目的基因,并经基因序列分析、细菌分离培养和生化鉴定进一步证实.其敏感性为78cfu(克隆形成单位).结论:所建立的方法具有敏感、特异、快速、简便的特点,可应用于SS2感染应急检测、流行病学监测和实验室快速诊断.
목적:용다중PCR종림상표본중동시검측저련2형특이성급5개독력상관기인,건립SS2실험실쾌속진단급응급검측적핵산감정방법.방법:근거이보고적인물서렬설계병합성8대인물(함1대내대조인물),경과PCR반응조건적우화여조합,채용동일PCR반응조건여순배정서,직접종림상표본혹배양물중동시일차성확증속특이성(tuf)、충특이성(16S rRNA)、협막다당(cps2J)、용균매석방단백(mrp)、세포외단백인자(ef)、용혈소(sly)화감유철-3-린산탈경매(gapdh)등기인;병대방법적특이성화민감성진행평고.결과:운용소건립적방법가직접종림상의사저련감염환자적뇌척액、혈액、쌍상배양액화혈배양물중일차성확증출상술8대인물적목적기인,병경기인서렬분석、세균분리배양화생화감정진일보증실.기민감성위78cfu(극륭형성단위).결론:소건립적방법구유민감、특이、쾌속、간편적특점,가응용우SS2감염응급검측、류행병학감측화실험실쾌속진단.