中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2007年
5期
333-336
,共4页
董金蓉%谢飞%刘勇%郭仁%彭建新%刘红岩
董金蓉%謝飛%劉勇%郭仁%彭建新%劉紅巖
동금용%사비%류용%곽인%팽건신%류홍암
人乳头瘤病毒%L1蛋白%毕赤酵母%基因优化
人乳頭瘤病毒%L1蛋白%畢赤酵母%基因優化
인유두류병독%L1단백%필적효모%기인우화
目的 利用毕赤酵母表达系统(Pichia pastoris)高效表达HPV16L1蛋白.方法 按照Pichia pastoris密码子偏爱性合成HPV16L1基因,构建pAO819r-16L1表达载体,电转化至GS115菌株中,经MD板和不同浓度G418筛选,挑取高拷贝整合菌株,甲醇诱导目的蛋白的表达,用HPV16L1抗血清,经Western blot检测蛋白的特异性.结果 重组质粒pAO819r-16L1在甲醇营养型酵母菌株中经甲醇诱导后可表达HPV16L1蛋白,在试管中的表达量超过10 mg/ml,经Western blot验证,该蛋白可与抗血清特异结合,在相对分子质量55 000附近出现目的条带,证明该蛋白确为HPV16L1蛋白.结论 利用毕赤酵母表达系统可高效表达HPV16L1蛋白,为研制HPV疫苗奠定基础.
目的 利用畢赤酵母錶達繫統(Pichia pastoris)高效錶達HPV16L1蛋白.方法 按照Pichia pastoris密碼子偏愛性閤成HPV16L1基因,構建pAO819r-16L1錶達載體,電轉化至GS115菌株中,經MD闆和不同濃度G418篩選,挑取高拷貝整閤菌株,甲醇誘導目的蛋白的錶達,用HPV16L1抗血清,經Western blot檢測蛋白的特異性.結果 重組質粒pAO819r-16L1在甲醇營養型酵母菌株中經甲醇誘導後可錶達HPV16L1蛋白,在試管中的錶達量超過10 mg/ml,經Western blot驗證,該蛋白可與抗血清特異結閤,在相對分子質量55 000附近齣現目的條帶,證明該蛋白確為HPV16L1蛋白.結論 利用畢赤酵母錶達繫統可高效錶達HPV16L1蛋白,為研製HPV疫苗奠定基礎.
목적 이용필적효모표체계통(Pichia pastoris)고효표체HPV16L1단백.방법 안조Pichia pastoris밀마자편애성합성HPV16L1기인,구건pAO819r-16L1표체재체,전전화지GS115균주중,경MD판화불동농도G418사선,도취고고패정합균주,갑순유도목적단백적표체,용HPV16L1항혈청,경Western blot검측단백적특이성.결과 중조질립pAO819r-16L1재갑순영양형효모균주중경갑순유도후가표체HPV16L1단백,재시관중적표체량초과10 mg/ml,경Western blot험증,해단백가여항혈청특이결합,재상대분자질량55 000부근출현목적조대,증명해단백학위HPV16L1단백.결론 이용필적효모표체계통가고효표체HPV16L1단백,위연제HPV역묘전정기출.
