CAJ | 학술논문

目的研究缺氧时肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)膜电位、细胞质游离Ca2+及线粒体游离Ca2+的动态变化,探讨缺氧性肺血管收缩 (hypoxic pulmonary vasocontriction,HPV)的可能机制.方法分离成年Wistar大鼠PASMCs进行体外培养,将PASMCs分为3组:分别负载荧光指示剂Di-8-ANEPPS (2 μmol/L)、Fluo-4/AM (4 μmol/L)和Rhod-5F (5 μmol/L).利用Na2S2O4 (2 mmol/L)的强还原特性,对细胞进行化学缺氧干预,在共聚焦显微镜下观察缺氧环境下细胞膜电位、细胞质Ca2+和线粒体Ca2+的动态变化.结果用Na2S2O4对PASMCs施加缺氧刺激后,PASMCs细胞膜电位荧光强度迅速大幅度降低,继而迅速回升,于100 s时升至峰值且高于初始水平,随后逐渐下降低于初始水平;缺氧刺激后PASMCs细胞质Ca2+荧光强度缓慢增高,并呈持续增高趋势;PASMCs线粒体Ca2+荧光强度在缺氧刺激后迅速增高,持续约30 s后回降至低于起始值,随后开始回升,达到并逐渐高于起始值.结论缺氧刺激PASMCs,导致膜电位、细胞质Ca2+和线粒体Ca2+呈特定模式的升高和降低的动态变化,除了细胞质Ca2+稳态失衡之外,线粒体Ca2+变化可能在HPV发生中也起着重要的作用.
목적 연구결양시폐동맥평활기세포(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)막전위、세포질유리Ca2+급선립체유리Ca2+적동태변화,탐토결양성폐혈관수축 (hypoxic pulmonary vasocontriction,HPV)적가능궤제.방법 분리성년Wistar대서PASMCs진행체외배양,장PASMCs분위3조:분별부재형광지시제Di-8-ANEPPS (2 μmol/L)、Fluo-4/AM (4 μmol/L)화Rhod-5F (5 μmol/L).이용Na2S2O4 (2 mmol/L)적강환원특성,대세포진행화학결양간예,재공취초현미경하관찰결양배경하세포막전위、세포질Ca2+화선립체Ca2+적동태변화.결과 용Na2S2O4대PASMCs시가결양자격후,PASMCs세포막전위형광강도신속대폭도강저,계이신속회승,우100 s시승지봉치차고우초시수평,수후축점하강저우초시수평;결양자격후PASMCs세포질Ca2+형광강도완만증고,병정지속증고추세;PASMCs선립체Ca2+형광강도재결양자격후신속증고,지속약30 s후회강지저우기시치,수후개시회승,체도병축점고우기시치.결론 결양자격PASMCs,도치막전위、세포질Ca2+화선립체Ca2+정특정모식적승고화강저적동태변화,제료세포질Ca2+은태실형지외,선립체Ca2+변화가능재HPV발생중야기착중요적작용.