食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2011年
10期
115-119
,共5页
何鸿举%樊明涛%刘晓娇%吕丽娟%焦凌霞
何鴻舉%樊明濤%劉曉嬌%呂麗娟%焦凌霞
하홍거%번명도%류효교%려려연%초릉하
扩展青霉%基因组DNA%聚合酶链式反应(PCR)%优化
擴展青黴%基因組DNA%聚閤酶鏈式反應(PCR)%優化
확전청매%기인조DNA%취합매련식반응(PCR)%우화
研究扩展青霉DNA的提取及其聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测条件的优化.分别采用玻璃珠法、氯化苄法、玻璃珠+氯化苄法提取扩展青霉菌及对照菌株的基因组DNA,经紫外测定和电泳检测实验,分析提取DNA的质量浓度和纯度;同时,根据扩展青霉多聚半乳糖醛酸酶基因内一段保守序列设计合成一对288bp的扩增引物,并对PCR检测条件进行优化.结果表明:玻璃珠+氯化苄法提取到的DNA质量浓度和纯度较理想,扩展青霉DNA可获得良好的特异性扩增,PCR扩增的最适退火温度为53～59℃,最适引物浓度为0.04～0.06umol/L,最适模板质量浓度为2.40～5.28μg/mL,dNTPs浓度对PCR扩增影响不大.运用实验所得优化参数检测扩展青霉菌,整个过程仅需3～4h,和传统的培养检测法相比,该方法可有效提高检测效率,可进一步将该方法应用于实践.
研究擴展青黴DNA的提取及其聚閤酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)檢測條件的優化.分彆採用玻璃珠法、氯化芐法、玻璃珠+氯化芐法提取擴展青黴菌及對照菌株的基因組DNA,經紫外測定和電泳檢測實驗,分析提取DNA的質量濃度和純度;同時,根據擴展青黴多聚半乳糖醛痠酶基因內一段保守序列設計閤成一對288bp的擴增引物,併對PCR檢測條件進行優化.結果錶明:玻璃珠+氯化芐法提取到的DNA質量濃度和純度較理想,擴展青黴DNA可穫得良好的特異性擴增,PCR擴增的最適退火溫度為53～59℃,最適引物濃度為0.04～0.06umol/L,最適模闆質量濃度為2.40～5.28μg/mL,dNTPs濃度對PCR擴增影響不大.運用實驗所得優化參數檢測擴展青黴菌,整箇過程僅需3～4h,和傳統的培養檢測法相比,該方法可有效提高檢測效率,可進一步將該方法應用于實踐.
연구확전청매DNA적제취급기취합매련식반응(polymerase chain reaction,PCR)검측조건적우화.분별채용파리주법、록화변법、파리주+록화변법제취확전청매균급대조균주적기인조DNA,경자외측정화전영검측실험,분석제취DNA적질량농도화순도;동시,근거확전청매다취반유당철산매기인내일단보수서렬설계합성일대288bp적확증인물,병대PCR검측조건진행우화.결과표명:파리주+록화변법제취도적DNA질량농도화순도교이상,확전청매DNA가획득량호적특이성확증,PCR확증적최괄퇴화온도위53～59℃,최괄인물농도위0.04～0.06umol/L,최괄모판질량농도위2.40～5.28μg/mL,dNTPs농도대PCR확증영향불대.운용실험소득우화삼수검측확전청매균,정개과정부수3～4h,화전통적배양검측법상비,해방법가유효제고검측효솔,가진일보장해방법응용우실천.
