中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2011年
7期
3-5
,共3页
白立景%鞠辉明%牟玉莲%杨述林%李奎%陈明勇
白立景%鞠輝明%牟玉蓮%楊述林%李奎%陳明勇
백립경%국휘명%모옥련%양술림%리규%진명용
植酸酶%appA2基因%真核表达载体%表达
植痠酶%appA2基因%真覈錶達載體%錶達
식산매%appA2기인%진핵표체재체%표체
根据已经公布的植酸酶appA2基因序列,设计合成了1对特异性引物,应用RT-PCR技术从大肠杆菌中扩增得到植酸酶appA2基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组真核表达质粒pcDNA-appA2,对重组表达质粒鉴定正确后,转染猪PK15细胞,经G418筛选后,通过实时荧光定量PCR检测细胞内appA2表达,同时测定细胞内植酸酶的活性,检测结果表明,本试验成功构建了pcDNA-appA2重组真核表达载体,转染细胞后appA2的表达量是对照组的1 686.55倍,同时具有较好的植酸酶活性,为通过生物反应器制备植酸酶研究奠定了基础.
根據已經公佈的植痠酶appA2基因序列,設計閤成瞭1對特異性引物,應用RT-PCR技術從大腸桿菌中擴增得到植痠酶appA2基因,併將其剋隆到真覈錶達載體pcDNA3.1(+)中,構建瞭重組真覈錶達質粒pcDNA-appA2,對重組錶達質粒鑒定正確後,轉染豬PK15細胞,經G418篩選後,通過實時熒光定量PCR檢測細胞內appA2錶達,同時測定細胞內植痠酶的活性,檢測結果錶明,本試驗成功構建瞭pcDNA-appA2重組真覈錶達載體,轉染細胞後appA2的錶達量是對照組的1 686.55倍,同時具有較好的植痠酶活性,為通過生物反應器製備植痠酶研究奠定瞭基礎.
근거이경공포적식산매appA2기인서렬,설계합성료1대특이성인물,응용RT-PCR기술종대장간균중확증득도식산매appA2기인,병장기극륭도진핵표체재체pcDNA3.1(+)중,구건료중조진핵표체질립pcDNA-appA2,대중조표체질립감정정학후,전염저PK15세포,경G418사선후,통과실시형광정량PCR검측세포내appA2표체,동시측정세포내식산매적활성,검측결과표명,본시험성공구건료pcDNA-appA2중조진핵표체재체,전염세포후appA2적표체량시대조조적1 686.55배,동시구유교호적식산매활성,위통과생물반응기제비식산매연구전정료기출.
