人胰岛素突变体基因的融合表达
인이도소돌변체기인적융합표체
Expression of human insulin mutant gene in fusion protein form
  • 万方数据
    山西医科大学学报 산서의과대학학보
    JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
    2004年 5期 445-448 ,共4页

    于保锋%解军%陈显久%常冰梅%张悦红%胡晓年%牛勃%程牛亮

    우보봉%해군%진현구%상빙매%장열홍%호효년%우발%정우량

    人胰岛素突变体%克隆,基因%基因融合表达 人胰島素突變體%剋隆,基因%基因融閤錶達
    인이도소돌변체%극륭,기인%기인융합표체
    目的以pTXB1作为融合表达载体,构建人胰岛素突变体(M-insulin)的基因表达克隆,表达及纯化.方法基因合成胰岛素突变体的cDNA序列,酶切后装入融合表达质粒pTXB1,基因测序正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达,初步纯化.结果融合蛋白的分子量约为33 000,表达量占菌体总蛋白的50%以上.融合蛋白主要以包涵体的形式存在,洗涤包涵体后融合蛋白的纯度达到85%以上.Western-blot表明表达蛋白具有胰岛素抗原活性.活性测定显示,每升诱导培养后的菌液表达产物中,具有的放射免疫活性为0.5 U.结论成功地构建了人胰岛素突变体的融合表达体系,为进一步的研究奠定了基础.
    목적이pTXB1작위융합표체재체,구건인이도소돌변체(M-insulin)적기인표체극륭,표체급순화.방법기인합성이도소돌변체적cDNA서렬,매절후장입융합표체질립pTXB1,기인측서정학후전화대장간균BL21(DE3),유도표체,초보순화.결과융합단백적분자량약위33 000,표체량점균체총단백적50%이상.융합단백주요이포함체적형식존재,세조포함체후융합단백적순도체도85%이상.Western-blot표명표체단백구유이도소항원활성.활성측정현시,매승유도배양후적균액표체산물중,구유적방사면역활성위0.5 U.결론성공지구건료인이도소돌변체적융합표체체계,위진일보적연구전정료기출.
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