CAJ | 학술논문

目的观察犬骨髓间叶干细胞的体外多向分化潜力,为损伤组织的干细胞移植修复提供理论基础.方法利用梯度-贴壁筛选法分离、培养与扩增骨髓间叶干细胞.利用化学诱导剂5-氮胞苷(20μmol/L),血管内皮细胞生长因子(VEGF 10ng/ml),成骨细胞诱导剂(地塞米松10nMol/L,抗坏血酸0.05mMol,β甘油磷酸钠10mMol/L)以及成脂肪细胞诱导剂(1-甲基3-异丁基黄嘌呤0.5mmol/L,地塞米松1μmol/L,胰岛素10mg/L,消炎痛100mmol/L),分别定向诱导骨髓间叶干细胞分化为心肌细胞、血管内皮细胞、成骨细胞与脂肪细胞.再应用细胞形态观察、免疫细胞化学染色及电镜对分化细胞进行鉴定.结果利用梯度-贴壁筛选法可以分离培养与扩增骨髓间叶干细胞.5-氮胞苷可诱导干细胞呈现肌管、肌丝、心房颗粒,且肌细胞特异性蛋白α-actinin,Myosin,α-Actin,Troponin Ⅰ免疫染色阳性;VEGF可诱导骨髓间叶干细胞出现管网状、血管样及鹅卵石样结构,vWF免疫染色阳性;成骨细胞诱导剂可诱导分化细胞碱性磷酸酶阳性;成脂肪细胞诱导剂使分化细胞内出现脂肪滴,油红O染色示脂滴为橙红色.结论成年犬骨髓间叶干细胞在体外具备多向分化潜力.在化学或生物诱导剂的作用下,犬骨髓间叶干细胞能够定向分化为心肌细胞、血管内皮细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种间叶组织类型细胞.
목적관찰견골수간협간세포적체외다향분화잠력,위손상조직적간세포이식수복제공이론기출.방법이용제도-첩벽사선법분리、배양여확증골수간협간세포.이용화학유도제5-담포감(20μmol/L),혈관내피세포생장인자(VEGF 10ng/ml),성골세포유도제(지새미송10nMol/L,항배혈산0.05mMol,β감유린산납10mMol/L)이급성지방세포유도제(1-갑기3-이정기황표령0.5mmol/L,지새미송1μmol/L,이도소10mg/L,소염통100mmol/L),분별정향유도골수간협간세포분화위심기세포、혈관내피세포、성골세포여지방세포.재응용세포형태관찰、면역세포화학염색급전경대분화세포진행감정.결과이용제도-첩벽사선법가이분리배양여확증골수간협간세포.5-담포감가유도간세포정현기관、기사、심방과립,차기세포특이성단백α-actinin,Myosin,α-Actin,Troponin Ⅰ면역염색양성;VEGF가유도골수간협간세포출현관망상、혈관양급아란석양결구,vWF면역염색양성;성골세포유도제가유도분화세포감성린산매양성;성지방세포유도제사분화세포내출현지방적,유홍O염색시지적위등홍색.결론성년견골수간협간세포재체외구비다향분화잠력.재화학혹생물유도제적작용하,견골수간협간세포능구정향분화위심기세포、혈관내피세포、성골세포、지방세포등다충간협조직류형세포.