中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
6期
59-62
,共4页
FSHα亚基基因%克隆%融合表达
FSHα亞基基因%剋隆%融閤錶達
FSHα아기기인%극륭%융합표체
以原构建的克隆载体为模板,PCR扩增梅花鹿FSHα亚基基因,TA克隆后经双酶切插入表达载体pGEX-6P-2,阳性克隆导入E.coli BL21,IPTG诱导表达GST-FSHα融合蛋白,SDS-PAGE进行分析鉴定.结果表明,FSHαPCR产物大小约380 bp,测序结果与GenBank序列一致;重组表达载体pGEX-6P-2-FSHα构建成功;融合蛋白经SDS-PAGE分析,结果发现,在分子质量39.3 ku处出现特异性蛋白质条带,说明梅花鹿FSHα亚基基因片段已在E.coli BL21中成功表达了FSHα-GST融合蛋白.
以原構建的剋隆載體為模闆,PCR擴增梅花鹿FSHα亞基基因,TA剋隆後經雙酶切插入錶達載體pGEX-6P-2,暘性剋隆導入E.coli BL21,IPTG誘導錶達GST-FSHα融閤蛋白,SDS-PAGE進行分析鑒定.結果錶明,FSHαPCR產物大小約380 bp,測序結果與GenBank序列一緻;重組錶達載體pGEX-6P-2-FSHα構建成功;融閤蛋白經SDS-PAGE分析,結果髮現,在分子質量39.3 ku處齣現特異性蛋白質條帶,說明梅花鹿FSHα亞基基因片段已在E.coli BL21中成功錶達瞭FSHα-GST融閤蛋白.
이원구건적극륭재체위모판,PCR확증매화록FSHα아기기인,TA극륭후경쌍매절삽입표체재체pGEX-6P-2,양성극륭도입E.coli BL21,IPTG유도표체GST-FSHα융합단백,SDS-PAGE진행분석감정.결과표명,FSHαPCR산물대소약380 bp,측서결과여GenBank서렬일치;중조표체재체pGEX-6P-2-FSHα구건성공;융합단백경SDS-PAGE분석,결과발현,재분자질량39.3 ku처출현특이성단백질조대,설명매화록FSHα아기기인편단이재E.coli BL21중성공표체료FSHα-GST융합단백.
