中国临床新医学
中國臨床新醫學
중국림상신의학
CHINESE JOURNAL OF NEW CLINICAL MEDICINE
2011年
5期
394-397
,共4页
吴锟%谢玉波%王连振%肖强
吳錕%謝玉波%王連振%肖彊
오곤%사옥파%왕련진%초강
cDNA文库%胃癌%定向克隆
cDNA文庫%胃癌%定嚮剋隆
cDNA문고%위암%정향극륭
目的快速构建成人胃癌组织cDNA文库.方法从人胃癌组织分离总RNA,以含有Sfi IB酶切位点的oligo(dT)引物合成第1链cDNA,以含Sfi IA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经Sfi I(IA & IB)酶切,以CHROMA SPIN+TE-1000柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTripIEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库.结果经检测共获得2.73×106个重组子,重组率约为94%,插入片段大小平均为1.2 kb.结论用SMART方法构建的胃癌组织cDNA文库质量较高,为以后筛选胃癌相关基因奠定了基础.
目的快速構建成人胃癌組織cDNA文庫.方法從人胃癌組織分離總RNA,以含有Sfi IB酶切位點的oligo(dT)引物閤成第1鏈cDNA,以含Sfi IA酶切位點的SMART寡覈苷痠為引物經LD-PCR擴增雙鏈cDNA,雙鏈cDNA經Sfi I(IA & IB)酶切,以CHROMA SPIN+TE-1000柱分級分離cDNA,收集符閤需要的cDNA片段併純化,隨後將之與λTripIEx2載體連接經體外包裝成噬菌體cDNA文庫.結果經檢測共穫得2.73×106箇重組子,重組率約為94%,插入片段大小平均為1.2 kb.結論用SMART方法構建的胃癌組織cDNA文庫質量較高,為以後篩選胃癌相關基因奠定瞭基礎.
목적쾌속구건성인위암조직cDNA문고.방법종인위암조직분리총RNA,이함유Sfi IB매절위점적oligo(dT)인물합성제1련cDNA,이함Sfi IA매절위점적SMART과핵감산위인물경LD-PCR확증쌍련cDNA,쌍련cDNA경Sfi I(IA & IB)매절,이CHROMA SPIN+TE-1000주분급분리cDNA,수집부합수요적cDNA편단병순화,수후장지여λTripIEx2재체련접경체외포장성서균체cDNA문고.결과경검측공획득2.73×106개중조자,중조솔약위94%,삽입편단대소평균위1.2 kb.결론용SMART방법구건적위암조직cDNA문고질량교고,위이후사선위암상관기인전정료기출.
