中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2012年
4期
23-26
,共4页
新孢子虫病%多重PCR%内标%共扩增
新孢子蟲病%多重PCR%內標%共擴增
신포자충병%다중PCR%내표%공확증
本试验以牛新孢子虫NcSAG1基因、No-5基因和NcSRS2基因作为检测新孢子虫病的目的基因,以牛性腺(prolactin)基因作为内标对反应过程进行监测,对上述基因各设计1对引物.结果表明,4对引物可分别扩增出201 bp、231 bp、256bp和156 bp的目的条带.经反应条件的优化,该方法具有较好的灵敏度,各质粒在103 copies/反应时,均可于同一管中扩增出较清晰的目的条带,只比单重PCR的灵敏度低了10倍,且不受内标模板存在的影响.经临床应用研究,该方法具有较好的特异性和重复性,可用来对新孢子虫进行快速准确的检测.
本試驗以牛新孢子蟲NcSAG1基因、No-5基因和NcSRS2基因作為檢測新孢子蟲病的目的基因,以牛性腺(prolactin)基因作為內標對反應過程進行鑑測,對上述基因各設計1對引物.結果錶明,4對引物可分彆擴增齣201 bp、231 bp、256bp和156 bp的目的條帶.經反應條件的優化,該方法具有較好的靈敏度,各質粒在103 copies/反應時,均可于同一管中擴增齣較清晰的目的條帶,隻比單重PCR的靈敏度低瞭10倍,且不受內標模闆存在的影響.經臨床應用研究,該方法具有較好的特異性和重複性,可用來對新孢子蟲進行快速準確的檢測.
본시험이우신포자충NcSAG1기인、No-5기인화NcSRS2기인작위검측신포자충병적목적기인,이우성선(prolactin)기인작위내표대반응과정진행감측,대상술기인각설계1대인물.결과표명,4대인물가분별확증출201 bp、231 bp、256bp화156 bp적목적조대.경반응조건적우화,해방법구유교호적령민도,각질립재103 copies/반응시,균가우동일관중확증출교청석적목적조대,지비단중PCR적령민도저료10배,차불수내표모판존재적영향.경림상응용연구,해방법구유교호적특이성화중복성,가용래대신포자충진행쾌속준학적검측.
