中华实验和临床病毒学杂志
中華實驗和臨床病毒學雜誌
중화실험화림상병독학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
2007年
2期
150-152
,共3页
韩继生%肖宗慧%姚海兰%任红雁%刘哲伟
韓繼生%肖宗慧%姚海蘭%任紅雁%劉哲偉
한계생%초종혜%요해란%임홍안%류철위
RNA%肠道病毒B型,人%RNA病毒感染
RNA%腸道病毒B型,人%RNA病毒感染
RNA%장도병독B형,인%RNA병독감염
目的 利用RNA干扰技术,在细胞、蛋白和基因水平上观察短双链RNA对柯萨奇病毒体外感染Hela细胞的增殖抑制作用、对病毒RNA复制和蛋白合成的影响.方法 应用病毒致细胞病变作用保护实验、空斑形成减少实验、Western Blot、RT-PCR等方法,在体外检测其抗CVB3病毒作用.结果 设计、合成的8条SiRNA中,针对基因组2B、VP4、2A、3C区的SiRNA-2、SiRNA-3、SiRNA-6、SiRNA-7具有不同程度的抑制病毒作用.其中,病毒基因组2B的SiRN-2作用效果最好,对Hela细胞CVB3感染72 h后致细胞病变和空斑形成的抑制率为95%,抑制病毒蛋白的合成,病毒基因的复制水平也显著降低,在病毒0.1、0.01、0.001、0.0001 MOI感染水平上对CVB3致细胞病变作用的抑制率分别为30%、70%、88%和99%(48 h).结论 针对CVB3基因组2B的SiRNA-2具有较强的抑制柯萨奇B3型病毒感染的作用.
目的 利用RNA榦擾技術,在細胞、蛋白和基因水平上觀察短雙鏈RNA對柯薩奇病毒體外感染Hela細胞的增殖抑製作用、對病毒RNA複製和蛋白閤成的影響.方法 應用病毒緻細胞病變作用保護實驗、空斑形成減少實驗、Western Blot、RT-PCR等方法,在體外檢測其抗CVB3病毒作用.結果 設計、閤成的8條SiRNA中,針對基因組2B、VP4、2A、3C區的SiRNA-2、SiRNA-3、SiRNA-6、SiRNA-7具有不同程度的抑製病毒作用.其中,病毒基因組2B的SiRN-2作用效果最好,對Hela細胞CVB3感染72 h後緻細胞病變和空斑形成的抑製率為95%,抑製病毒蛋白的閤成,病毒基因的複製水平也顯著降低,在病毒0.1、0.01、0.001、0.0001 MOI感染水平上對CVB3緻細胞病變作用的抑製率分彆為30%、70%、88%和99%(48 h).結論 針對CVB3基因組2B的SiRNA-2具有較彊的抑製柯薩奇B3型病毒感染的作用.
목적 이용RNA간우기술,재세포、단백화기인수평상관찰단쌍련RNA대가살기병독체외감염Hela세포적증식억제작용、대병독RNA복제화단백합성적영향.방법 응용병독치세포병변작용보호실험、공반형성감소실험、Western Blot、RT-PCR등방법,재체외검측기항CVB3병독작용.결과 설계、합성적8조SiRNA중,침대기인조2B、VP4、2A、3C구적SiRNA-2、SiRNA-3、SiRNA-6、SiRNA-7구유불동정도적억제병독작용.기중,병독기인조2B적SiRN-2작용효과최호,대Hela세포CVB3감염72 h후치세포병변화공반형성적억제솔위95%,억제병독단백적합성,병독기인적복제수평야현저강저,재병독0.1、0.01、0.001、0.0001 MOI감염수평상대CVB3치세포병변작용적억제솔분별위30%、70%、88%화99%(48 h).결론 침대CVB3기인조2B적SiRNA-2구유교강적억제가살기B3형병독감염적작용.
