CAJ | 학술논문

采用定点诱变技术,将R338A点突变引入人凝血因子Ⅸ基因,并构建于AAV载体上,以rHSV/AAV杂合辅助病毒系统介导制备rAAV-hFIX重组病毒,然后,经肌肉注射对血友病B小鼠进行治疗实验,观察该突变基因在小鼠体内的表达、活性以及机体对该突变衍生物的免疫反应与治疗效果.结果显示:(i)治疗小鼠体内可检测到hFIX-R338A突变衍生物的存在,并持续15周以上;(ii)突变衍生物hFIX-R338A在小鼠血浆中的凝血活性达(34.2±5.23)%,显著高于野生型Ⅸ因子凝血活性((14.27±3.4)%);(iii)治疗小鼠体内未检测到抗Ⅸ因子突变衍生物抗体的存在;(iv)未发现与治疗相关的局部及全身性毒副作用.提示:以AAV介导人凝血因子Ⅸ高活性突变衍生物hFLX-R338A基因治疗可能成为替代野生型Ⅸ因子进行血友病B基因治疗的一个更为有效的途径.
채용정점유변기술,장R338A점돌변인입인응혈인자Ⅸ기인,병구건우AAV재체상,이rHSV/AAV잡합보조병독계통개도제비rAAV-hFIX중조병독,연후,경기육주사대혈우병B소서진행치료실험,관찰해돌변기인재소서체내적표체、활성이급궤체대해돌변연생물적면역반응여치료효과.결과현시:(i)치료소서체내가검측도hFIX-R338A돌변연생물적존재,병지속15주이상;(ii)돌변연생물hFIX-R338A재소서혈장중적응혈활성체(34.2±5.23)%,현저고우야생형Ⅸ인자응혈활성((14.27±3.4)%);(iii)치료소서체내미검측도항Ⅸ인자돌변연생물항체적존재;(iv)미발현여치료상관적국부급전신성독부작용.제시:이AAV개도인응혈인자Ⅸ고활성돌변연생물hFLX-R338A기인치료가능성위체대야생형Ⅸ인자진행혈우병B기인치료적일개경위유효적도경.