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CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2007年
1期
101-106
,共6页
李茜%陈蓉%孙毓庆%胡育筑
李茜%陳蓉%孫毓慶%鬍育築
리천%진용%손육경%호육축
低pH%毛细管区带电泳法%寡核苷酸%硫代反义寡核苷酸
低pH%毛細管區帶電泳法%寡覈苷痠%硫代反義寡覈苷痠
저pH%모세관구대전영법%과핵감산%류대반의과핵감산
在低pH条件下采用毛细管区带电泳法对寡核苷酸(PO-ODNs)及具有药用价值的硫代反义寡核苷酸(PS-ODNs)药物"癌泰得"系列样品(18~20 mers)进行分离,并系统考察优化了缓冲溶液的pH、缓冲溶液的种类及浓度、添加剂的种类及浓度、电压、温度等因素对样品单碱基分离的影响.其中缓冲溶液的pH对分离起决定性的作用,而添加剂尿素的加入显著提高了PS-ODNs样品的分离度.结果表明,采用未涂层弹性石英毛细管(50 μm,总长49.0 cm,有效长度40.7 cm),以50 mmol/L磷酸二氢钠-磷酸(pH 2.24)-7 mol/L尿素为缓冲溶液,压力进样(2 kPa×10 s),负极进样,正极检测,在分离电压-20 kV、柱温25 ℃、检测波长260 nm条件下,可实现寡核苷酸及硫代反义寡核苷酸混合样品的单碱基分离.PO-ODNs的18~19 mers及19~20 mers样品的平均分离度分别为4.68,3.20;PS-ODNs的18~19 mers及19~20 mers样品的平均分离度分别为1.23及0.81.该法操作简单,重现性好,可为反义寡核苷酸药物的分析提供借鉴.
在低pH條件下採用毛細管區帶電泳法對寡覈苷痠(PO-ODNs)及具有藥用價值的硫代反義寡覈苷痠(PS-ODNs)藥物"癌泰得"繫列樣品(18~20 mers)進行分離,併繫統攷察優化瞭緩遲溶液的pH、緩遲溶液的種類及濃度、添加劑的種類及濃度、電壓、溫度等因素對樣品單堿基分離的影響.其中緩遲溶液的pH對分離起決定性的作用,而添加劑尿素的加入顯著提高瞭PS-ODNs樣品的分離度.結果錶明,採用未塗層彈性石英毛細管(50 μm,總長49.0 cm,有效長度40.7 cm),以50 mmol/L燐痠二氫鈉-燐痠(pH 2.24)-7 mol/L尿素為緩遲溶液,壓力進樣(2 kPa×10 s),負極進樣,正極檢測,在分離電壓-20 kV、柱溫25 ℃、檢測波長260 nm條件下,可實現寡覈苷痠及硫代反義寡覈苷痠混閤樣品的單堿基分離.PO-ODNs的18~19 mers及19~20 mers樣品的平均分離度分彆為4.68,3.20;PS-ODNs的18~19 mers及19~20 mers樣品的平均分離度分彆為1.23及0.81.該法操作簡單,重現性好,可為反義寡覈苷痠藥物的分析提供藉鑒.
재저pH조건하채용모세관구대전영법대과핵감산(PO-ODNs)급구유약용개치적류대반의과핵감산(PS-ODNs)약물"암태득"계렬양품(18~20 mers)진행분리,병계통고찰우화료완충용액적pH、완충용액적충류급농도、첨가제적충류급농도、전압、온도등인소대양품단감기분리적영향.기중완충용액적pH대분리기결정성적작용,이첨가제뇨소적가입현저제고료PS-ODNs양품적분리도.결과표명,채용미도층탄성석영모세관(50 μm,총장49.0 cm,유효장도40.7 cm),이50 mmol/L린산이경납-린산(pH 2.24)-7 mol/L뇨소위완충용액,압력진양(2 kPa×10 s),부겁진양,정겁검측,재분리전압-20 kV、주온25 ℃、검측파장260 nm조건하,가실현과핵감산급류대반의과핵감산혼합양품적단감기분리.PO-ODNs적18~19 mers급19~20 mers양품적평균분리도분별위4.68,3.20;PS-ODNs적18~19 mers급19~20 mers양품적평균분리도분별위1.23급0.81.해법조작간단,중현성호,가위반의과핵감산약물적분석제공차감.