中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2008年
7期
1249-1253
,共5页
孙智睿%王艳丽%杜丽娟%赵雅君%王丽娜%徐长庆%张伟华
孫智睿%王豔麗%杜麗娟%趙雅君%王麗娜%徐長慶%張偉華
손지예%왕염려%두려연%조아군%왕려나%서장경%장위화
缺氧%受体,钙敏感%内质网%应激%半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12%心肌细胞
缺氧%受體,鈣敏感%內質網%應激%半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶12%心肌細胞
결양%수체,개민감%내질망%응격%반광안산천동안산단백매12%심기세포
目的:观察钙敏感受体表达增加诱发内质网应激在缺氧复氧性心肌损伤中的作用.方法:乳鼠原代心肌细胞培养4-5 d后,随机分为5组:正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/Re组)、阻断剂(NiCl2,CdCl2)组、激动剂(GdCl3,NiCl2,GdCl2)组和caffeine组.采用饱和氮气pH6.8的D-Hands液培养细胞3 h,再用含20%新生牛血清的DMEM液培养细胞9 h,复制心肌缺氧/复氧模型.检测血清LDH活力,MTT检测细胞存活率,心肌细胞caspase-12和CaSR蛋白表达水平Western blotting检测,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)测定心肌细胞内游离钙的变化.结果:缺氧/复氧组和激动剂组LDH活力、细胞内游离钙浓度均高于对照组;同时,caspase-12和CaSR的表达也明显高于对照组.反之,细胞存活率低于对照组.结论:心肌缺氧/复氧过程中,钙敏感受体表达增多,从而破坏了细胞内钙稳态诱发过度的内质网应激,通过caspase-12等凋亡蛋白表达的增多等途径引起心肌细胞凋亡.
目的:觀察鈣敏感受體錶達增加誘髮內質網應激在缺氧複氧性心肌損傷中的作用.方法:乳鼠原代心肌細胞培養4-5 d後,隨機分為5組:正常對照組(N組)、缺氧/複氧組(H/Re組)、阻斷劑(NiCl2,CdCl2)組、激動劑(GdCl3,NiCl2,GdCl2)組和caffeine組.採用飽和氮氣pH6.8的D-Hands液培養細胞3 h,再用含20%新生牛血清的DMEM液培養細胞9 h,複製心肌缺氧/複氧模型.檢測血清LDH活力,MTT檢測細胞存活率,心肌細胞caspase-12和CaSR蛋白錶達水平Western blotting檢測,激光掃描共聚焦顯微鏡(LSCM)測定心肌細胞內遊離鈣的變化.結果:缺氧/複氧組和激動劑組LDH活力、細胞內遊離鈣濃度均高于對照組;同時,caspase-12和CaSR的錶達也明顯高于對照組.反之,細胞存活率低于對照組.結論:心肌缺氧/複氧過程中,鈣敏感受體錶達增多,從而破壞瞭細胞內鈣穩態誘髮過度的內質網應激,通過caspase-12等凋亡蛋白錶達的增多等途徑引起心肌細胞凋亡.
목적:관찰개민감수체표체증가유발내질망응격재결양복양성심기손상중적작용.방법:유서원대심기세포배양4-5 d후,수궤분위5조:정상대조조(N조)、결양/복양조(H/Re조)、조단제(NiCl2,CdCl2)조、격동제(GdCl3,NiCl2,GdCl2)조화caffeine조.채용포화담기pH6.8적D-Hands액배양세포3 h,재용함20%신생우혈청적DMEM액배양세포9 h,복제심기결양/복양모형.검측혈청LDH활력,MTT검측세포존활솔,심기세포caspase-12화CaSR단백표체수평Western blotting검측,격광소묘공취초현미경(LSCM)측정심기세포내유리개적변화.결과:결양/복양조화격동제조LDH활력、세포내유리개농도균고우대조조;동시,caspase-12화CaSR적표체야명현고우대조조.반지,세포존활솔저우대조조.결론:심기결양/복양과정중,개민감수체표체증다,종이파배료세포내개은태유발과도적내질망응격,통과caspase-12등조망단백표체적증다등도경인기심기세포조망.
