中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2009年
14期
2656-2660
,共5页
于丽%张炳强%管英俊%张雪莉%马丽%张华芳
于麗%張炳彊%管英俊%張雪莉%馬麗%張華芳
우려%장병강%관영준%장설리%마려%장화방
间充质干细胞%脐血%香丹注射液%神经细胞%分化
間充質榦細胞%臍血%香丹註射液%神經細胞%分化
간충질간세포%제혈%향단주사액%신경세포%분화
背景:选择一种高效、细胞损伤低的诱导人脐血间充质干细胞分化为神经细胞的方法是其应用于临床的前提.目的:拟采用传统中药香丹注射液联合生长因子诱导脐血间充质干细胞向神经细胞方向分化,并且与单纯生长因子的诱导作用进行比较.设计、时间及地点:免疫细胞化学水平的细胞观察实验,于2006-09/2008-04在潍坊医学院组织胚胎学教研室完成.材料:人脐血标本取自潍坊市妇幼保健院,香丹注射液的有效成分为丹参素.方法:采用密度梯度离心法分离人脐皿单个核细胞,贴壁法筛选出人脐血间充质干细胞,体外扩增,以免疫荧光方法检测表面抗原.分为2组进行诱导分化,香丹注射液联合生长因子诱导组采用30 g/L香丹注射液联合表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子诱导脐血间充质下细胞向神经细胞方向分化,并且与单纯生长因子诱导组进行比较.主要观察指标:采用免疫细胞化学方法和免疫荧光方法检测诱导前后神经元特异性标志(神经元核抗原、β-TubulinⅢ)和神经胶质纤维酸性蛋白的表达.结果:香丹注射液联合生长因子诱导法对脐血间充质干细胞损伤作用小,诱导效率高.脐血间充质干细胞经香丹沣射液诱导后出现类似神经细胞的形态改变,胞体呈椭圆形,伸出长突起.免疫组织化学和免疫荧光方法鉴定显示,诱导后的细胞能特异性表达神经元核抗原和β-TubulinⅢ,而神经胶质纤维酸性蛋白阳性细胞较少.香丹注射液联合生长因子诱导组的β-TubulinⅢ和神经元核抗原的阳性细胞率显著高于生长因子诱导组(P＜0.05),神经胶质纤维酸性蛋白阳性细胞率明显低于生长因子诱导组(P＜0.05).结论:香丹注射液联合生长因子诱导对脐血间充质干细胞损伤作用小,诱导效率高,优于生长因子诱导法.且体外诱导后细胞丰要分化为神经元样细胞,而非星形胶质细胞.
揹景:選擇一種高效、細胞損傷低的誘導人臍血間充質榦細胞分化為神經細胞的方法是其應用于臨床的前提.目的:擬採用傳統中藥香丹註射液聯閤生長因子誘導臍血間充質榦細胞嚮神經細胞方嚮分化,併且與單純生長因子的誘導作用進行比較.設計、時間及地點:免疫細胞化學水平的細胞觀察實驗,于2006-09/2008-04在濰坊醫學院組織胚胎學教研室完成.材料:人臍血標本取自濰坊市婦幼保健院,香丹註射液的有效成分為丹參素.方法:採用密度梯度離心法分離人臍皿單箇覈細胞,貼壁法篩選齣人臍血間充質榦細胞,體外擴增,以免疫熒光方法檢測錶麵抗原.分為2組進行誘導分化,香丹註射液聯閤生長因子誘導組採用30 g/L香丹註射液聯閤錶皮生長因子和堿性成纖維細胞生長因子誘導臍血間充質下細胞嚮神經細胞方嚮分化,併且與單純生長因子誘導組進行比較.主要觀察指標:採用免疫細胞化學方法和免疫熒光方法檢測誘導前後神經元特異性標誌(神經元覈抗原、β-TubulinⅢ)和神經膠質纖維痠性蛋白的錶達.結果:香丹註射液聯閤生長因子誘導法對臍血間充質榦細胞損傷作用小,誘導效率高.臍血間充質榦細胞經香丹灃射液誘導後齣現類似神經細胞的形態改變,胞體呈橢圓形,伸齣長突起.免疫組織化學和免疫熒光方法鑒定顯示,誘導後的細胞能特異性錶達神經元覈抗原和β-TubulinⅢ,而神經膠質纖維痠性蛋白暘性細胞較少.香丹註射液聯閤生長因子誘導組的β-TubulinⅢ和神經元覈抗原的暘性細胞率顯著高于生長因子誘導組(P＜0.05),神經膠質纖維痠性蛋白暘性細胞率明顯低于生長因子誘導組(P＜0.05).結論:香丹註射液聯閤生長因子誘導對臍血間充質榦細胞損傷作用小,誘導效率高,優于生長因子誘導法.且體外誘導後細胞豐要分化為神經元樣細胞,而非星形膠質細胞.
배경:선택일충고효、세포손상저적유도인제혈간충질간세포분화위신경세포적방법시기응용우림상적전제.목적:의채용전통중약향단주사액연합생장인자유도제혈간충질간세포향신경세포방향분화,병차여단순생장인자적유도작용진행비교.설계、시간급지점:면역세포화학수평적세포관찰실험,우2006-09/2008-04재유방의학원조직배태학교연실완성.재료:인제혈표본취자유방시부유보건원,향단주사액적유효성분위단삼소.방법:채용밀도제도리심법분리인제명단개핵세포,첩벽법사선출인제혈간충질간세포,체외확증,이면역형광방법검측표면항원.분위2조진행유도분화,향단주사액연합생장인자유도조채용30 g/L향단주사액연합표피생장인자화감성성섬유세포생장인자유도제혈간충질하세포향신경세포방향분화,병차여단순생장인자유도조진행비교.주요관찰지표:채용면역세포화학방법화면역형광방법검측유도전후신경원특이성표지(신경원핵항원、β-TubulinⅢ)화신경효질섬유산성단백적표체.결과:향단주사액연합생장인자유도법대제혈간충질간세포손상작용소,유도효솔고.제혈간충질간세포경향단풍사액유도후출현유사신경세포적형태개변,포체정타원형,신출장돌기.면역조직화학화면역형광방법감정현시,유도후적세포능특이성표체신경원핵항원화β-TubulinⅢ,이신경효질섬유산성단백양성세포교소.향단주사액연합생장인자유도조적β-TubulinⅢ화신경원핵항원적양성세포솔현저고우생장인자유도조(P＜0.05),신경효질섬유산성단백양성세포솔명현저우생장인자유도조(P＜0.05).결론:향단주사액연합생장인자유도대제혈간충질간세포손상작용소,유도효솔고,우우생장인자유도법.차체외유도후세포봉요분화위신경원양세포,이비성형효질세포.
