基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
6期
561-565
,共5页
刘琦%段春礼%吴波%范春香%张韬%赵焕英%赵春礼%杨慧
劉琦%段春禮%吳波%範春香%張韜%趙煥英%趙春禮%楊慧
류기%단춘례%오파%범춘향%장도%조환영%조춘례%양혜
α-突触核蛋白%磷酸化α-突触核蛋白%神经元保护%多巴胺神经元
α-突觸覈蛋白%燐痠化α-突觸覈蛋白%神經元保護%多巴胺神經元
α-돌촉핵단백%린산화α-돌촉핵단백%신경원보호%다파알신경원
目的 研究α-突触核蛋白(α-SYN)129位点磷酸化修饰是否具有神经元保护作用.方法 应用反转录病毒感染小鼠多巴胺能神经元细胞MN9D,通过实时定量PCR检测各组细胞内α-SYN过表达情况,并通过免疫细胞化学方法检测野生型α-SYN(WT/α-SYN)及129位点磷酸化α-SYN(S129D/α-SYN)过表达后α-SYN在细胞内聚集情况,应用CCK-8检测细胞活力,观察WT/α-SYN及S129D/α-SYN对MN9D的细胞毒性,从而明确S129D/α-SYN对多巴胺能神经元的影响.结果 实时定量PCR结果显示,WT/α-SYN及S129D/α-SYN在MN9D细胞内均过表达(P<0.01).WT/α-SYN过表达组细胞活力明显下降(P<0.01),共聚焦显微镜观察未见明显的α-SYN聚集;S129D/α-SYN过表达组细胞内可观察到明显的α-SYN聚集体,同WT/α-SYN组相比细胞活力有明显提高(P<0.01).结论 129位点丝氨酸的磷酸化修饰在一定程度上减轻了WT/α-SYN过表达所引起的细胞毒性.
目的 研究α-突觸覈蛋白(α-SYN)129位點燐痠化脩飾是否具有神經元保護作用.方法 應用反轉錄病毒感染小鼠多巴胺能神經元細胞MN9D,通過實時定量PCR檢測各組細胞內α-SYN過錶達情況,併通過免疫細胞化學方法檢測野生型α-SYN(WT/α-SYN)及129位點燐痠化α-SYN(S129D/α-SYN)過錶達後α-SYN在細胞內聚集情況,應用CCK-8檢測細胞活力,觀察WT/α-SYN及S129D/α-SYN對MN9D的細胞毒性,從而明確S129D/α-SYN對多巴胺能神經元的影響.結果 實時定量PCR結果顯示,WT/α-SYN及S129D/α-SYN在MN9D細胞內均過錶達(P<0.01).WT/α-SYN過錶達組細胞活力明顯下降(P<0.01),共聚焦顯微鏡觀察未見明顯的α-SYN聚集;S129D/α-SYN過錶達組細胞內可觀察到明顯的α-SYN聚集體,同WT/α-SYN組相比細胞活力有明顯提高(P<0.01).結論 129位點絲氨痠的燐痠化脩飾在一定程度上減輕瞭WT/α-SYN過錶達所引起的細胞毒性.
목적 연구α-돌촉핵단백(α-SYN)129위점린산화수식시부구유신경원보호작용.방법 응용반전록병독감염소서다파알능신경원세포MN9D,통과실시정량PCR검측각조세포내α-SYN과표체정황,병통과면역세포화학방법검측야생형α-SYN(WT/α-SYN)급129위점린산화α-SYN(S129D/α-SYN)과표체후α-SYN재세포내취집정황,응용CCK-8검측세포활력,관찰WT/α-SYN급S129D/α-SYN대MN9D적세포독성,종이명학S129D/α-SYN대다파알능신경원적영향.결과 실시정량PCR결과현시,WT/α-SYN급S129D/α-SYN재MN9D세포내균과표체(P<0.01).WT/α-SYN과표체조세포활력명현하강(P<0.01),공취초현미경관찰미견명현적α-SYN취집;S129D/α-SYN과표체조세포내가관찰도명현적α-SYN취집체,동WT/α-SYN조상비세포활력유명현제고(P<0.01).결론 129위점사안산적린산화수식재일정정도상감경료WT/α-SYN과표체소인기적세포독성.
