华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2009年
4期
430-432,437
,共4页
孙黎%袁响林%王桂华%罗学来%李小兰%胡俊波
孫黎%袁響林%王桂華%囉學來%李小蘭%鬍俊波
손려%원향림%왕계화%라학래%리소란%호준파
磷脂酰肌醇-3-激酶%细胞周期%细胞增殖%肝癌
燐脂酰肌醇-3-激酶%細胞週期%細胞增殖%肝癌
린지선기순-3-격매%세포주기%세포증식%간암
目的 观察磷脂酰肌醇-3-激酶(P13K)的调节亚单位--p55PIKN端24个氨基酸抑制肝癌细胞增殖的作用.方法 以含有p55PIK-N端24个氨基酸(N24)的腺病毒载体Ad-N24一GFP及对照病毒Ad-GFP,感染肝癌HepG2细胞,流式细胞仪检测细胞周期进程,应用BrdU掺人的方法检测其对细胞DNA合成的影响,Western blot分析细胞内高表达N24多肽后相关蛋白的表达水平.结果 N24能有效阻滞HepG2细胞周期进程于G0/G1期,S期和G2/M期细胞减少,Ad-N24-GFP组各期细胞分布为:G0/G1期(56.3±3.0)%,S期(30.1±2.9)%,G2/M期(13.6±4.1)%.而对照组腺病毒各期细胞分布为:G0/G1期(40.6±2.1)%,S期(42.7±3.3)%,G2/M期(16.7±2.8)%;BrdU阳性细胞比例显示:Ad-N24一GFP组R2为(31.8±5.2)%,Ad-GFP组R2为(48.5±3.7)%,提示N24能有效抑制HepG2细胞的DNA合成;Western blot检测显示高表达N24对细胞内的AKT磷酸化水平没有显著影响.结论 在HepG2细胞中过表达N24能有效阻滞肝癌细胞周期进程,抑制细胞DNA合成.p55PIK为肿瘤的基因治疗提供了一个新的分子靶点.
目的 觀察燐脂酰肌醇-3-激酶(P13K)的調節亞單位--p55PIKN耑24箇氨基痠抑製肝癌細胞增殖的作用.方法 以含有p55PIK-N耑24箇氨基痠(N24)的腺病毒載體Ad-N24一GFP及對照病毒Ad-GFP,感染肝癌HepG2細胞,流式細胞儀檢測細胞週期進程,應用BrdU摻人的方法檢測其對細胞DNA閤成的影響,Western blot分析細胞內高錶達N24多肽後相關蛋白的錶達水平.結果 N24能有效阻滯HepG2細胞週期進程于G0/G1期,S期和G2/M期細胞減少,Ad-N24-GFP組各期細胞分佈為:G0/G1期(56.3±3.0)%,S期(30.1±2.9)%,G2/M期(13.6±4.1)%.而對照組腺病毒各期細胞分佈為:G0/G1期(40.6±2.1)%,S期(42.7±3.3)%,G2/M期(16.7±2.8)%;BrdU暘性細胞比例顯示:Ad-N24一GFP組R2為(31.8±5.2)%,Ad-GFP組R2為(48.5±3.7)%,提示N24能有效抑製HepG2細胞的DNA閤成;Western blot檢測顯示高錶達N24對細胞內的AKT燐痠化水平沒有顯著影響.結論 在HepG2細胞中過錶達N24能有效阻滯肝癌細胞週期進程,抑製細胞DNA閤成.p55PIK為腫瘤的基因治療提供瞭一箇新的分子靶點.
목적 관찰린지선기순-3-격매(P13K)적조절아단위--p55PIKN단24개안기산억제간암세포증식적작용.방법 이함유p55PIK-N단24개안기산(N24)적선병독재체Ad-N24일GFP급대조병독Ad-GFP,감염간암HepG2세포,류식세포의검측세포주기진정,응용BrdU참인적방법검측기대세포DNA합성적영향,Western blot분석세포내고표체N24다태후상관단백적표체수평.결과 N24능유효조체HepG2세포주기진정우G0/G1기,S기화G2/M기세포감소,Ad-N24-GFP조각기세포분포위:G0/G1기(56.3±3.0)%,S기(30.1±2.9)%,G2/M기(13.6±4.1)%.이대조조선병독각기세포분포위:G0/G1기(40.6±2.1)%,S기(42.7±3.3)%,G2/M기(16.7±2.8)%;BrdU양성세포비례현시:Ad-N24일GFP조R2위(31.8±5.2)%,Ad-GFP조R2위(48.5±3.7)%,제시N24능유효억제HepG2세포적DNA합성;Western blot검측현시고표체N24대세포내적AKT린산화수평몰유현저영향.결론 재HepG2세포중과표체N24능유효조체간암세포주기진정,억제세포DNA합성.p55PIK위종류적기인치료제공료일개신적분자파점.
