贵州农业科学
貴州農業科學
귀주농업과학
GUIZHOU AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
119-122
,共4页
詹寿年%吴拥军%郭倩倩%卢彪
詹壽年%吳擁軍%郭倩倩%盧彪
첨수년%오옹군%곽천천%로표
谷氨酰胺酶%酶活中心%枯草芽孢杆菌%glsA基因
穀氨酰胺酶%酶活中心%枯草芽孢桿菌%glsA基因
곡안선알매%매활중심%고초아포간균%glsA기인
为筛选获得高活性谷氨酰胺酶豆豉芽孢杆菌菌株,提高谷氨酸的含量,试验通过康维皿弥散法对525株芽孢杆菌进行酶活检测,获得一株产谷氨酰胺酶活力为68.407 mg NH3/(g曲·h·37℃)的B.subtilis GA317菌株,其酶活力较B.subtilis BJ3-2高5.59倍.对2个菌株谷氨酰胺酶编码基因glsA进行克隆测序,结果表明:2个菌株glsA基因核酸序列和蛋白序列同源性分别为63%和47%,表现出较大的差异.B.subtilis GA317与B.subtilis BJ3-2蛋白序列中都含有a3,a6,β8 3个酶活性位点,分别位于蛋白序列中67-80、117-125、260-267的3个区域,B.subtilis G317的a3区域有7个氨基酸发生改变,在a6和β8区域各有1个氨基酸发生改变.研究为进一步利用基因工程技术改良菌种产谷氨酰胺酶活力奠走了一定基础.
為篩選穫得高活性穀氨酰胺酶豆豉芽孢桿菌菌株,提高穀氨痠的含量,試驗通過康維皿瀰散法對525株芽孢桿菌進行酶活檢測,穫得一株產穀氨酰胺酶活力為68.407 mg NH3/(g麯·h·37℃)的B.subtilis GA317菌株,其酶活力較B.subtilis BJ3-2高5.59倍.對2箇菌株穀氨酰胺酶編碼基因glsA進行剋隆測序,結果錶明:2箇菌株glsA基因覈痠序列和蛋白序列同源性分彆為63%和47%,錶現齣較大的差異.B.subtilis GA317與B.subtilis BJ3-2蛋白序列中都含有a3,a6,β8 3箇酶活性位點,分彆位于蛋白序列中67-80、117-125、260-267的3箇區域,B.subtilis G317的a3區域有7箇氨基痠髮生改變,在a6和β8區域各有1箇氨基痠髮生改變.研究為進一步利用基因工程技術改良菌種產穀氨酰胺酶活力奠走瞭一定基礎.
위사선획득고활성곡안선알매두시아포간균균주,제고곡안산적함량,시험통과강유명미산법대525주아포간균진행매활검측,획득일주산곡안선알매활력위68.407 mg NH3/(g곡·h·37℃)적B.subtilis GA317균주,기매활력교B.subtilis BJ3-2고5.59배.대2개균주곡안선알매편마기인glsA진행극륭측서,결과표명:2개균주glsA기인핵산서렬화단백서렬동원성분별위63%화47%,표현출교대적차이.B.subtilis GA317여B.subtilis BJ3-2단백서렬중도함유a3,a6,β8 3개매활성위점,분별위우단백서렬중67-80、117-125、260-267적3개구역,B.subtilis G317적a3구역유7개안기산발생개변,재a6화β8구역각유1개안기산발생개변.연구위진일보이용기인공정기술개량균충산곡안선알매활력전주료일정기출.
