中南医学科学杂志
中南醫學科學雜誌
중남의학과학잡지
JOURNAL OF UNIVERSITY OF SOUTH CHINA(MEDICAL EDITION)
2011年
6期
611-614,618
,共5页
陆春雪%吴移谋%彭波%刘良专%蔡恒玲%李忠玉
陸春雪%吳移謀%彭波%劉良專%蔡恆玲%李忠玉
륙춘설%오이모%팽파%류량전%채항령%리충옥
沙眼衣原体%CT143%克隆表达%纯化%免疫活性
沙眼衣原體%CT143%剋隆錶達%純化%免疫活性
사안의원체%CT143%극륭표체%순화%면역활성
目的 克隆沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)T细胞抗原Ct143基因,表达并纯化该蛋白,检测其免疫活性. 方法 采用PCR技术从Ct基因组中扩增Ct143基因,并构建pGEX-6p-Ct143原核表达质粒,转化E.coli XL1-Blue,IPTG诱导重组GST-CT143融合蛋白表达,经酶切后得到无GST标签的纯蛋白免疫Balb/c鼠,ELISA及Western-blot分析CT143蛋白免疫原性及免疫反应性. 结果 成功构建了pGEX-6p-CT143原核表达质粒,序列测定证实重组质粒插入片段与GenBank登陆的Ct D型一致,长度为843 bp；GST-CT143融合蛋白在E.coli中获得稳定高效表达；纯蛋白与佐剂混匀后肌肉免疫小鼠,ELISA检测免疫小鼠的血清效价为1∶12 800,Western blot结果表明该蛋白与Ct泌尿生殖道感染病人混合血清中IgG结合,具有免疫反应性. 结论 成功克隆表达了CtT细胞抗原CT143,该抗原经纯化后具有良好的免疫原性及免疫反应性.
目的 剋隆沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,Ct)T細胞抗原Ct143基因,錶達併純化該蛋白,檢測其免疫活性. 方法 採用PCR技術從Ct基因組中擴增Ct143基因,併構建pGEX-6p-Ct143原覈錶達質粒,轉化E.coli XL1-Blue,IPTG誘導重組GST-CT143融閤蛋白錶達,經酶切後得到無GST標籤的純蛋白免疫Balb/c鼠,ELISA及Western-blot分析CT143蛋白免疫原性及免疫反應性. 結果 成功構建瞭pGEX-6p-CT143原覈錶達質粒,序列測定證實重組質粒插入片段與GenBank登陸的Ct D型一緻,長度為843 bp；GST-CT143融閤蛋白在E.coli中穫得穩定高效錶達；純蛋白與佐劑混勻後肌肉免疫小鼠,ELISA檢測免疫小鼠的血清效價為1∶12 800,Western blot結果錶明該蛋白與Ct泌尿生殖道感染病人混閤血清中IgG結閤,具有免疫反應性. 結論 成功剋隆錶達瞭CtT細胞抗原CT143,該抗原經純化後具有良好的免疫原性及免疫反應性.
목적 극륭사안의원체(Chlamydia trachomatis,Ct)T세포항원Ct143기인,표체병순화해단백,검측기면역활성. 방법 채용PCR기술종Ct기인조중확증Ct143기인,병구건pGEX-6p-Ct143원핵표체질립,전화E.coli XL1-Blue,IPTG유도중조GST-CT143융합단백표체,경매절후득도무GST표첨적순단백면역Balb/c서,ELISA급Western-blot분석CT143단백면역원성급면역반응성. 결과 성공구건료pGEX-6p-CT143원핵표체질립,서렬측정증실중조질립삽입편단여GenBank등륙적Ct D형일치,장도위843 bp；GST-CT143융합단백재E.coli중획득은정고효표체；순단백여좌제혼균후기육면역소서,ELISA검측면역소서적혈청효개위1∶12 800,Western blot결과표명해단백여Ct비뇨생식도감염병인혼합혈청중IgG결합,구유면역반응성. 결론 성공극륭표체료CtT세포항원CT143,해항원경순화후구유량호적면역원성급면역반응성.
