中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2006年
10期
757-761
,共5页
贺兴鄂%雷建华%杨旭%王文龙%罗红雨%梁骏
賀興鄂%雷建華%楊旭%王文龍%囉紅雨%樑駿
하흥악%뢰건화%양욱%왕문룡%라홍우%량준
肝炎病毒,乙型%RNA干扰%p53蛋白质%三氧化二砷%基因,X
肝炎病毒,乙型%RNA榦擾%p53蛋白質%三氧化二砷%基因,X
간염병독,을형%RNA간우%p53단백질%삼양화이신%기인,X
目的 应用短发夹状RNA介导的RNA干扰研究乙型肝炎病毒X基因(HBX)和三氧化二砷(As2O3)对HepG2细胞p53表达和活性的影响.方法 以2μmol/L As2O3处理HepG2细胞和表达HBX的HepG2-X,以未处理细胞为对照,提取细胞裂解物或胞核裂解物,采用改进的酶联免疫吸附法检测p53总量和相对活性吸光度.应用脂质体介导具有HBX序列特异性短发夹状RNA表达载体Xi-S1、Xi-S2和序列无关对照Xi-S3转染HepG2-X,再次观察As2O3处理对p53表达和活性的影响.结果 As2O3作用使HepG2和HepG2-X细胞p53蛋白水平上调和p53相对活性比增强.表达HBX后As2O3诱导的p53蛋白水平有所上调,但显著抑制p53相对活性.短发夹状RNA抑制HBX的表达后其对p53的活性抑制得以解除.结论 As2O3使HepG2细胞p53表达上调和活性增强.应用短发夹状RNA介导的RNA干扰有利于研究HBX的表达对p53表达和活性的影响.HBX表达上调As2O3诱导的p53蛋白水平,但显著抑制p53的结合与转录调节活性.
目的 應用短髮夾狀RNA介導的RNA榦擾研究乙型肝炎病毒X基因(HBX)和三氧化二砷(As2O3)對HepG2細胞p53錶達和活性的影響.方法 以2μmol/L As2O3處理HepG2細胞和錶達HBX的HepG2-X,以未處理細胞為對照,提取細胞裂解物或胞覈裂解物,採用改進的酶聯免疫吸附法檢測p53總量和相對活性吸光度.應用脂質體介導具有HBX序列特異性短髮夾狀RNA錶達載體Xi-S1、Xi-S2和序列無關對照Xi-S3轉染HepG2-X,再次觀察As2O3處理對p53錶達和活性的影響.結果 As2O3作用使HepG2和HepG2-X細胞p53蛋白水平上調和p53相對活性比增彊.錶達HBX後As2O3誘導的p53蛋白水平有所上調,但顯著抑製p53相對活性.短髮夾狀RNA抑製HBX的錶達後其對p53的活性抑製得以解除.結論 As2O3使HepG2細胞p53錶達上調和活性增彊.應用短髮夾狀RNA介導的RNA榦擾有利于研究HBX的錶達對p53錶達和活性的影響.HBX錶達上調As2O3誘導的p53蛋白水平,但顯著抑製p53的結閤與轉錄調節活性.
목적 응용단발협상RNA개도적RNA간우연구을형간염병독X기인(HBX)화삼양화이신(As2O3)대HepG2세포p53표체화활성적영향.방법 이2μmol/L As2O3처리HepG2세포화표체HBX적HepG2-X,이미처리세포위대조,제취세포렬해물혹포핵렬해물,채용개진적매련면역흡부법검측p53총량화상대활성흡광도.응용지질체개도구유HBX서렬특이성단발협상RNA표체재체Xi-S1、Xi-S2화서렬무관대조Xi-S3전염HepG2-X,재차관찰As2O3처리대p53표체화활성적영향.결과 As2O3작용사HepG2화HepG2-X세포p53단백수평상조화p53상대활성비증강.표체HBX후As2O3유도적p53단백수평유소상조,단현저억제p53상대활성.단발협상RNA억제HBX적표체후기대p53적활성억제득이해제.결론 As2O3사HepG2세포p53표체상조화활성증강.응용단발협상RNA개도적RNA간우유리우연구HBX적표체대p53표체화활성적영향.HBX표체상조As2O3유도적p53단백수평,단현저억제p53적결합여전록조절활성.