河北农业大学学报
河北農業大學學報
하북농업대학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI
2009年
3期
59-62,66
,共5页
张冬冬%郭晓军%刘慧娟%雷白时%牛振东%朱宝成
張鼕鼕%郭曉軍%劉慧娟%雷白時%牛振東%硃寶成
장동동%곽효군%류혜연%뢰백시%우진동%주보성
木薯醇腈酶%枯草芽孢杆菌%分泌表达%活性
木藷醇腈酶%枯草芽孢桿菌%分泌錶達%活性
목서순정매%고초아포간균%분비표체%활성
醇腈酶(α-hydroxynitrile lyase, HNL)能够催化羰基化合物和HCN立体选择性的加工形成手性醇腈化合物.以含有木薯醇腈酶基因的重组质粒pET28a-HNL为模板,应用PCR扩增得到HNL基因,将其连接到pMD18-T载体中进行测序分析,然后通过Nde I和Xba I2个酶切位点将其连接到枯草芽孢杆菌表达载体pMA5Z2中,获得了含有HNL基因的重组质粒pMA5Z2-HNL,转化蛋白质三缺陷的枯草芽孢杆菌DB1342.SDS-PAGE显示HNL在枯草芽孢杆菌DB1342中获得表达,产物分泌到细胞外,每毫升发酵液中获得了2.108 U的醇腈酶.
醇腈酶(α-hydroxynitrile lyase, HNL)能夠催化羰基化閤物和HCN立體選擇性的加工形成手性醇腈化閤物.以含有木藷醇腈酶基因的重組質粒pET28a-HNL為模闆,應用PCR擴增得到HNL基因,將其連接到pMD18-T載體中進行測序分析,然後通過Nde I和Xba I2箇酶切位點將其連接到枯草芽孢桿菌錶達載體pMA5Z2中,穫得瞭含有HNL基因的重組質粒pMA5Z2-HNL,轉化蛋白質三缺陷的枯草芽孢桿菌DB1342.SDS-PAGE顯示HNL在枯草芽孢桿菌DB1342中穫得錶達,產物分泌到細胞外,每毫升髮酵液中穫得瞭2.108 U的醇腈酶.
순정매(α-hydroxynitrile lyase, HNL)능구최화탄기화합물화HCN입체선택성적가공형성수성순정화합물.이함유목서순정매기인적중조질립pET28a-HNL위모판,응용PCR확증득도HNL기인,장기련접도pMD18-T재체중진행측서분석,연후통과Nde I화Xba I2개매절위점장기련접도고초아포간균표체재체pMA5Z2중,획득료함유HNL기인적중조질립pMA5Z2-HNL,전화단백질삼결함적고초아포간균DB1342.SDS-PAGE현시HNL재고초아포간균DB1342중획득표체,산물분비도세포외,매호승발효액중획득료2.108 U적순정매.
