生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
7期
172-178
,共7页
方鸿滨%王永%江明锋%陈达文
方鴻濱%王永%江明鋒%陳達文
방홍빈%왕영%강명봉%진체문
牦牛%hnRNP K%RT-PCR%粘性末端连接法%基因克隆%蛋白质三级结构
牦牛%hnRNP K%RT-PCR%粘性末耑連接法%基因剋隆%蛋白質三級結構
모우%hnRNP K%RT-PCR%점성말단련접법%기인극륭%단백질삼급결구
为研究hnRNP K基因的生物学功能及其在牦牛中的特异性,利用RT-PCR和粘性末端连接法,分两段克隆了牦牛hnRNP K基因cDNA序列.序列分析结果表明,牦牛hnRNP K基因cDNA序列长11 706 bp,开放阅读框(ORF)长1 389 bp,编码463个氨基酸.序列比对结果表明,牦牛与黄牛hnRNP K cDNA序列的同源性达99.1%,编码的氨基酸同源性达到97.0%;在牦牛氨基酸序列中有15个突变.通过同源建模的方法成功构建了牦牛hnRNP K蛋白质三级结构,结果表明牦牛hnRNP K属于A型结构,而黄牛hnRNP K蛋白属于B型结构,其差异是由第459-463位氨基酸序列由"ADVEG"突变为"SGKFF"所致.乙酰化分析结果显示,牦牛hnRNP K对基因转录的影响水平跟黄牛是一致,表明不同物种hnRNP K功能的差异可能跟其氨基酸序列的差异有关.成功克隆的牦牛hnRNP K基因的cDNA序列为进一步分析该基因的功能提供参考.
為研究hnRNP K基因的生物學功能及其在牦牛中的特異性,利用RT-PCR和粘性末耑連接法,分兩段剋隆瞭牦牛hnRNP K基因cDNA序列.序列分析結果錶明,牦牛hnRNP K基因cDNA序列長11 706 bp,開放閱讀框(ORF)長1 389 bp,編碼463箇氨基痠.序列比對結果錶明,牦牛與黃牛hnRNP K cDNA序列的同源性達99.1%,編碼的氨基痠同源性達到97.0%;在牦牛氨基痠序列中有15箇突變.通過同源建模的方法成功構建瞭牦牛hnRNP K蛋白質三級結構,結果錶明牦牛hnRNP K屬于A型結構,而黃牛hnRNP K蛋白屬于B型結構,其差異是由第459-463位氨基痠序列由"ADVEG"突變為"SGKFF"所緻.乙酰化分析結果顯示,牦牛hnRNP K對基因轉錄的影響水平跟黃牛是一緻,錶明不同物種hnRNP K功能的差異可能跟其氨基痠序列的差異有關.成功剋隆的牦牛hnRNP K基因的cDNA序列為進一步分析該基因的功能提供參攷.
위연구hnRNP K기인적생물학공능급기재모우중적특이성,이용RT-PCR화점성말단련접법,분량단극륭료모우hnRNP K기인cDNA서렬.서렬분석결과표명,모우hnRNP K기인cDNA서렬장11 706 bp,개방열독광(ORF)장1 389 bp,편마463개안기산.서렬비대결과표명,모우여황우hnRNP K cDNA서렬적동원성체99.1%,편마적안기산동원성체도97.0%;재모우안기산서렬중유15개돌변.통과동원건모적방법성공구건료모우hnRNP K단백질삼급결구,결과표명모우hnRNP K속우A형결구,이황우hnRNP K단백속우B형결구,기차이시유제459-463위안기산서렬유"ADVEG"돌변위"SGKFF"소치.을선화분석결과현시,모우hnRNP K대기인전록적영향수평근황우시일치,표명불동물충hnRNP K공능적차이가능근기안기산서렬적차이유관.성공극륭적모우hnRNP K기인적cDNA서렬위진일보분석해기인적공능제공삼고.
