复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2011年
1期
26-31
,共6页
朱玮%秦新裕%张宏伟%陈君雪%吴红平%钱其军
硃瑋%秦新裕%張宏偉%陳君雪%吳紅平%錢其軍
주위%진신유%장굉위%진군설%오홍평%전기군
溶瘤腺病毒%IL-24%乳腺癌%人乳腺癌细胞株MDA-MB-231%正常成纤维细胞株MRC-5
溶瘤腺病毒%IL-24%乳腺癌%人乳腺癌細胞株MDA-MB-231%正常成纖維細胞株MRC-5
용류선병독%IL-24%유선암%인유선암세포주MDA-MB-231%정상성섬유세포주MRC-5
目的 构建携带IL-24基因的溶瘤腺病毒CNHK600-IL-24,评估CNHK600-IL-24在体外对乳腺癌细胞的杀伤能力.方法 将IL-24基因插入腺病毒穿梭载体SG502-ΔCR2,与5型腺病毒骨架载体pPE3共转染至人胚肾293细胞,获得溶瘤腺病毒CNHK600-IL-24.荧光显微镜观测及病毒体外增殖实验测评病毒在乳腺癌细胞MDA-MB-231和正常成纤维细胞MRC-5中的增殖情况;MTT法检测不同MOI值的病毒对两种细胞的抑制效应;ELISA法检测病毒感染细胞后上清液中IL-24的含量;Western blot法检测细胞内的IL-24蛋白;流式细胞检测细胞的凋亡情况.结果 CNHK600-IL-24经测序及PCR鉴定,病毒滴度为1.9×1010 pfu/mL.CNHK600-IL-24感染MDA-MB-231细胞后表现出强大的增殖、复制能力,而在MRC-5细胞内增殖并不明显;CNHK600-IL-24在很低的浓度就能对MDA-MB-231细胞产生明显的杀伤效应,而对MRC-5细胞的杀伤作用明显减弱;CNHK600-IL-24感染MDA-MB-231细胞后,IL-24蛋白的表达明显增多,而感染MRC-5细胞后产生的IL-24维持在很低的水平.流式细胞检测发现,病毒引起的MDA-MB-231细胞明显凋亡而MRC-5细胞的凋亡率很低.结论 本研究成功构建高滴度的溶瘤腺病毒CNHK600-IL-24,该病毒具有在乳腺癌细胞中特异性增殖并杀伤肿瘤细胞的能力.
目的 構建攜帶IL-24基因的溶瘤腺病毒CNHK600-IL-24,評估CNHK600-IL-24在體外對乳腺癌細胞的殺傷能力.方法 將IL-24基因插入腺病毒穿梭載體SG502-ΔCR2,與5型腺病毒骨架載體pPE3共轉染至人胚腎293細胞,穫得溶瘤腺病毒CNHK600-IL-24.熒光顯微鏡觀測及病毒體外增殖實驗測評病毒在乳腺癌細胞MDA-MB-231和正常成纖維細胞MRC-5中的增殖情況;MTT法檢測不同MOI值的病毒對兩種細胞的抑製效應;ELISA法檢測病毒感染細胞後上清液中IL-24的含量;Western blot法檢測細胞內的IL-24蛋白;流式細胞檢測細胞的凋亡情況.結果 CNHK600-IL-24經測序及PCR鑒定,病毒滴度為1.9×1010 pfu/mL.CNHK600-IL-24感染MDA-MB-231細胞後錶現齣彊大的增殖、複製能力,而在MRC-5細胞內增殖併不明顯;CNHK600-IL-24在很低的濃度就能對MDA-MB-231細胞產生明顯的殺傷效應,而對MRC-5細胞的殺傷作用明顯減弱;CNHK600-IL-24感染MDA-MB-231細胞後,IL-24蛋白的錶達明顯增多,而感染MRC-5細胞後產生的IL-24維持在很低的水平.流式細胞檢測髮現,病毒引起的MDA-MB-231細胞明顯凋亡而MRC-5細胞的凋亡率很低.結論 本研究成功構建高滴度的溶瘤腺病毒CNHK600-IL-24,該病毒具有在乳腺癌細胞中特異性增殖併殺傷腫瘤細胞的能力.
목적 구건휴대IL-24기인적용류선병독CNHK600-IL-24,평고CNHK600-IL-24재체외대유선암세포적살상능력.방법 장IL-24기인삽입선병독천사재체SG502-ΔCR2,여5형선병독골가재체pPE3공전염지인배신293세포,획득용류선병독CNHK600-IL-24.형광현미경관측급병독체외증식실험측평병독재유선암세포MDA-MB-231화정상성섬유세포MRC-5중적증식정황;MTT법검측불동MOI치적병독대량충세포적억제효응;ELISA법검측병독감염세포후상청액중IL-24적함량;Western blot법검측세포내적IL-24단백;류식세포검측세포적조망정황.결과 CNHK600-IL-24경측서급PCR감정,병독적도위1.9×1010 pfu/mL.CNHK600-IL-24감염MDA-MB-231세포후표현출강대적증식、복제능력,이재MRC-5세포내증식병불명현;CNHK600-IL-24재흔저적농도취능대MDA-MB-231세포산생명현적살상효응,이대MRC-5세포적살상작용명현감약;CNHK600-IL-24감염MDA-MB-231세포후,IL-24단백적표체명현증다,이감염MRC-5세포후산생적IL-24유지재흔저적수평.류식세포검측발현,병독인기적MDA-MB-231세포명현조망이MRC-5세포적조망솔흔저.결론 본연구성공구건고적도적용류선병독CNHK600-IL-24,해병독구유재유선암세포중특이성증식병살상종류세포적능력.
